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本论文文献研究部分主要对实验研究所涉及到的相关内容进行了文献综述,包括WLS近年来的实验研究进展、蛋白尿形成机制的相关研究、内皮素与肾脏病关系的相关研究、中药含药血清药理实验方法的研究进展、肾小球系膜细胞与蛋白尿关系的相关研究等内容。 实验研究主要在课题组前期工作的基础上展开,包括WLS的利尿有效组分初筛以及WLS减轻阿霉素(ADR)肾病大鼠蛋白尿作用机理的研究。 从WLS水煎液中按照溶剂极性依次递增分离法分离各组分,将分离出的石油醚萃取组分、氯仿萃取组分、乙酸乙酯萃取组分、醇沉物水溶液、醇沉后水溶液与WLS水煎液进行薄层色谱检识,并结合药效学利尿实验进行了利尿有效组分的初步筛选。 薄层层析图谱显示WLS水煎液中不同极性组分可以有效分离,但小鼠滤纸增重法和大鼠代谢笼法进行的药效学利尿实验结果均显示只有WLS水煎液在给药第2、3h内对水负荷动物有一定利尿作用,所分离各组分利尿作用均不明显,即:未能发现具有与原水煎液利尿作用相当的组分,分析原因能与下列因素有关:中药复方的各组分间很可能在进入体内的初期(例如在肠道)存在二级甚至是三、四级交互协同作用,因此需要通过正交设计或均匀设计将各组分相互组合之后再进一步观察其是否具有利尿作用;WLS中起到利尿作用的可能是一些微量或痕量的物质,在提取分离过程中有一定的损失;各脂溶性成分组在收集尿量的后期(3～5h)尿量较空白对照组有增加的趋势,但未有统计学差异,可能与样本量小有关,后期实验中考察各组分二级交互作用时,应在此基础上进一步加大样本量。 课题组前期工作已证实WLS可降低ADR肾病大鼠的尿蛋白含量,本论文着重WLS该作用的机理探讨,试图寻找其可能的作用靶系统及靶细胞。整体动物实验采用改良的分次尾静脉注射ADR的方法制备蛋白尿动物模型,各实验中均设立正常组、模型组以及给药组。 首先,将各组动物的尿蛋白进行了十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),对尿蛋白分子量分析的结果显示各组大鼠尿液中蛋白都以白蛋白(66KD)为主,还有若干分子量小于白蛋白的区带;正常组未见明显分子量大于白蛋白区带的条带,模型组在白蛋白区带的含量明显增加,且有明显的分