HUC-MSCs移植对大鼠亚急性期脊髓损伤Bax、Caspase-3表达的影响

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目的本课题研究移植脐带源性间充质干细胞(Human Umbilical cord-drivedMesenchymal stem cells,HUC-MSCs)后Bax、Caspase-3的表达,探讨其对亚急性脊髓损伤后神经功能的影响。方法1.将92只成年健康雄性SD大鼠用改良的Allen氏打击法建立大鼠脊髓(T10)损伤模型,随机分成空白组、单纯脊髓损伤组(SCI)、a组、b组、c组。各组再随机分为移植术后1天、7天、14天、21天4个亚组,空白组每亚组3只成年健康雄性SD大鼠,其余各组每亚组5只大鼠。单纯SCI组不注射HUC-MSCs,移植组于损伤后14天经大鼠尾静脉注射HUC-MSCs细胞生理盐水悬液(a组1x106、b组3x106、c组5x106个MSCs)。2.分别于移植术后1天、7天、14天、21天,应用BBB评分法评估各组大鼠运动功能恢复状况。3.移植术后21天取各组的标本观察损伤区域脊髓组织形态学变化。4.移植术后在7天、14天、21天时间点应用免疫荧光技术观察HUC-MSCs在体内迁移、存活情况。5.免疫组化法检测1天、7天、14天、21天各时间点SCI大鼠Bax及Caspase-3的表达情况。结果1.移植HUC-MSCs组与单纯SCI组大鼠的运动功能均有不同程度的恢复。移植HUC-MSCs组与单纯SCI组相比,损伤区域脊髓结构相对较完整,并表现出更加显著的运动功能改善(p<0.05)。2.免疫荧光显示HUC-MSCs细胞大量存活并聚集在损伤区域及其周边区域。3.移植HUC-MSCs后第7天、第14天、第21天,移植HUC-MSCs组脊髓损伤区及周边组织中Bax表达较单纯SCI组明显降低(P<0.05)。4.移植HUC-MSCs后第7天、第14天、第21天,移植HUC-MSCs组脊髓损伤区及周边组织中Caspase-3表达较单纯SCI组明显降低(P<0.05)。结论HUC-MSCs可向脊髓损伤区域发生迁徙、聚集,并在其内存活、分化促进大鼠亚急性脊髓损伤的神经功能的恢复,并可有效的降低损伤部位Bax、Caspase-3基因的表达,从而抑制细胞的凋亡,避免继发损伤,起到保护神经元的作用。
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