色谱串联三重四极杆质谱对禁限药多残留的检测方法研究

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禁限用药物类的兽药违法使用和过量滥用,给人类健康甚至环境都带来了巨大的危害。β2-受体激动剂、性激素、精神药物都属于禁限用药物,在畜牧业的饲养过程中,一种或者多种被大量使用以增加动物生长和瘦肉率。经过食物链后,残留在动物源性食品中的禁限用药物进入人体,长期积累导致人体代谢紊乱甚至威胁生命。因此,对动物源性食品中β2-受体激动剂、性激素、精神药物等多类药物残留进行准确的同时检测方法研究具有重要意义。本研究以26种β2-受体激动剂(包括克伦特罗、沙丁胺醇等)、20种性激素(包括孕酮、睾酮等)、15种精神药物(包括地西泮、三唑仑等)为研究对象。样品基质为市场上的牛肉和猪肝,采用超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法,建立了MIP(Molecularly imprinted polymer)固相萃取-UPLC-QqQ-MS/MS同时检测猪肝中26种β2-受体激动剂残留、UPLC-QqQ-MS/MS同时检测牛肉中20种性激素和猪肝中15种精神药物残留的方法。研究的主要结果如下:(1)MIP固相萃取-UPLC-QqQ-MS/MS法同时检测猪肝中26种β2-受体激动剂残留。样品基质在乙酸铵/乙酸的缓冲溶液(pH=5.2)中酶解后,经过MIP固相萃取柱净化。采用超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法检测,以0.1%甲酸水/甲醇为流动相,流速为0.3 m L/min,HSS T3色谱柱,色谱柱柱温40℃进行分离,正离子模式,多反应监控模式(MRM)进行检测。在0~10μg/kg的线性范围内,每种物质的标准曲线的相关系数(r2)均大于0.9952,方法检出限(LOD)在0.05~0.3μg/kg之间,定量限(LOQ)在0.17~1.0μg/kg之间;样品基质在0.5、1.0和5.0μg/kg的加标水平上的平均回收率为72.6%~108.9%,相对标准偏差为1.3%~11.7%。(2)UPLC-QqQ-MS/MS法同时检测20种性激素和15种精神药物残留。样品基质在乙酸铵/乙酸的缓冲溶液(pH=5.2)中酶解后,分别经过乙腈、乙酸乙酯和乙腈/乙酸乙酯(1:1)提取后,性激素经过HLB固相萃取柱净化,精神药物经过MCX固相萃取柱净化。两种物质使用同一种仪器方法检测。采用超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法检测,以0.1%甲酸水/乙腈为流动相,流速为0.45m L/min,BEH C18色谱柱,柱温40℃进行分离,正离子模式,多反应监控模式(MRM)进行检测。对于20种性激素,在0~10μg/kg的线性范围内,每种物质的标准曲线的相关系数均大于0.9931,方法检出限(LOD)在0.10~0.30μg/kg之间,定量限(LOQ)在0.40~1.0μg/kg之间;样品基质在0.5/1、2和5μg/kg的加标水平上的平均回收率为70.5%~95.1%,相对标准偏差为1.5%~13.9%。对于15种精神药物,在0~10μg/kg的线性范围内,每种物质的标准曲线的相关系数均大于0.9979,方法检出限(LOD)在0.05~0.20μg/kg之间,定量限(LOQ)在0.20~0.50μg/kg之间;样品基质在0.5、1.0和5.0μg/kg的加标水平上的平均回收率为70.9%~96.7%,相对标准偏差为3.7%~11.4%。本研究建立的检测方法灵敏度高、重复性好和准确性高,可满足国内外对动物源性食品中β2-受体激动剂、性激素和精神药物多残留的检测要求。
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