GH3.9基因过表达对拟南芥生长发育的影响研究

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生长素是一类含有一个不饱和芳香族环和一个乙酸侧链的内源激素,它直接参与植物根茎的生长和发育、顶端优势维持、胚胎中轴建立、植物的向地和向光反应以及刺激花器官生长等诸多过程,在植物整个生命周期过程中发挥着重要调节作用。生长素早期响应基因是指经生长素处理后能迅速被激活转录的一些基因。其中GH3基因家族属于典型的生长素早期响应基因,拟南芥中共含有20个GH3基因,表达产物GH3蛋白被发现具有吲哚乙酸(IAA)等植物生长素氨基酸化合成酶的功能,不仅能调整植物体内活性生长素浓度,影响植物生长发育;参与植物防卫反应从而增强植物抗逆性;而且还能参与光反应调控过程,促进光能的吸收。GH3.9基因是GH3家族中比较特殊的成员,它具有对低浓度外源生长素不敏感的特点。目前该领域的研究仅限于功能缺失突变体,本文拟对GH3.9基因过表达突变体的功能进行探讨。首先利用生物信息学方法对GH3.9基因进行表达和功能预测,再通过RT-PCR分析结果显示:GH3.9基因在野生型拟南芥的表达具有组织器官特异性,表达水平由高到低依次为:种子、茎、根、叶、花。接着以农杆菌介导的pEGAD-GH3.9转染和Basta筛选获得的过表达突变体纯合子为材料,首先考察野生型和过表达植株种子的萌发率,发现与野生型相比,种子的萌发率没有影响,从而推测GH3.9基因对种子的萌发没有调控作用;随后用不同强度的蓝光、红光和远红光处理播种后的种子,发现过表达植株在暗视野和弱光下下胚轴与野生型没有差异,但是在强光下下胚轴的生长比野生型受到更强的抑制,提示GH3.9基因参与了光对植物生长发育的调控;进一步用不同光照形式的白光处理,结果显示过表达植株的下胚轴生长速度相比较于野生型均显著降低;最后比较野生型和过表达植株的相关形态学指标,发现与野生型相比,过表达的雄蕊跟雌蕊的长度比值明显降低,果荚和植株明显变短变矮,植株成熟期显著延长,表明GH3.9基因除了种子的萌发过程,在植物生长发育的其它阶段都起到重要的调控作用。
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