葛根总黄酮诱导急性髓细胞白血病细胞株SHI-1细胞凋亡的实验研究

被引量 : 0次 | 上传用户:ellen
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
[背景与目的]葛根是南京中医药大学第一附属医院血液科于1989年根据解毒活血法独创复方中药制剂“血复康”的组要成分之一。临床上用于治疗急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)及慢性髓细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)已愈十年,疗效确切。近年来课题组研究发现,葛根主要活性成分葛根总黄酮(Puerariae radix flavones, PRF)在50μg/ml-200μg/ml的浓度范围内对NB4、Kasumi-1、HL-60、U937四种急性髓系白血病细胞株有选择性增殖抑制作用。本实验以急性单核细胞白血病细胞株SHI-1细胞株为研究对象,进一步研究PRF体外对SHI-1细胞的效应,并初步探讨可能的作用机制。[方法]以SHI-1细胞(MLL-AF6融合基因阳性,伴有P53表达异常;AML-M5b细胞株)为研究对象1)0-200μg/ml PRF处理SHI-1细胞24.、48及72小时,MTT法检测SHI-1细胞增殖抑制率,筛选PRF最佳工作浓度。2)0、50、100、150μg/mlPRF处理SHI-1细胞48小时,瑞吉氏染色观察细胞形态学改变;流式细胞术FITC-Annexinv/PI双染法检测细胞早期凋亡率;流式细胞术检测细胞周期进程。3)0、50、100、150μg/ml PRF处理SHI-1细胞48小时,RT-PCR检测MLL-AF6融合基因的改变。[结果]MTT法检测显示PRF在0-200μg/ml浓度范围内对SHI-1细胞有增殖抑制作用,有明显的时效-量效关系,48h IC50值为136.87μg/ml。0、50、100、150μg/mlPRF处理SHI-1细胞48h,瑞吉氏染色光镜下观察到细胞形态出现典型的凋亡特征;FITC-Annexinv/PI检测细胞早期凋亡率发现随药物浓度的增加,细胞凋亡率也明显升高;流式细胞术检测细胞周期发现随着PRF浓度的增加,G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加,阻止细胞周期进程于S期;RT-PCR显示:随着PRF浓度的增加,MLL-AF6融合基因无明显变化。[结论]200μg/ml以下浓度PRF体外能抑制SHI-1细胞增殖,具有时效-量效关系;150μg/ml以下浓度PRF能够诱导SHI-1细胞凋亡,阻滞细胞周期于S期;150μg/ml以下浓度PRF虽能有效诱导SHI-1细胞凋亡,但并不能在mRNA水平下调MLL-AF6致病融合基因的表达。
其他文献
瑶药金樱根为蔷薇科蔷薇属植物金樱子(Rose laevigata Michx)的根皮或根。金樱根入药的历史久远,《中华本草》、《本草纲目》等都有记载,也是广西的大宗中药材。本论文对金樱根化
人的性格是一个人对外界事物的比较稳定的倾向性态度。幼儿期是儿童性格开始形成的时期,家庭是构成社会的基本单位,家庭成员尤其是父母的日常言行、思想作风、性格特征等,都
蒋光慈是中国无产阶级文学的拓荒者和奠基人,他的文学理论和艺术作品代表了早期无产阶级文学水平。现代性革命是中国现代革命的必然选择,也是蒋光慈文学创作的主旋律。蒋光慈
目的分析在儿童患者中,变应性鼻炎(AR)伴鼻窦炎或腺样体肥大合并分泌性中耳炎(OME)的治疗相关性。方法选取我院耳鼻喉科2015年1—6月收治的4~12岁AR伴鼻窦炎、OME患者23例;AR伴腺
胎儿宫内感染导致的炎症反应综合症,是围产期新生儿脑损伤的重要原因之一。胎儿宫内炎性感染通过激活小胶质细胞,释放大量炎性细胞因子,损伤大脑白质。用药物干预方式阻止小胶质
目的探讨人附睾蛋白4(HE4)作为一项新指标在卵巢癌诊断中的临床效能。方法采用电化学发光检测技术测定92例恶性卵巢癌病患者、61例良性卵巢病患者、50例健康对照者的血清HE4
OpenVPN是一种典型的基于隧道技术的SSLVPN,采用SSL/TLS协议协商隧道加密密钥,借鉴ESP协议封装隧道数据,运用OpenSSL加密库加密隧道数据,使用虚拟网卡驱动扩展网络。本文设计