目的:构建人乳铁蛋白的沙漠小球藻GTD8A1表达系统,以获得转基因藻种GTD8A1-HLF;优化植物表达载体的电转化条件（电压、培养周期、渗透剂浓度、质粒浓度、渗透处理时间、电击缓冲液浓度）,以增加阳性克隆率和细胞成活率;优化产物条件（p H、C、N、P、Na Cl、Mg、Fe、Zn、B和Cu）,以提高转基因藻种GTD8A1-HLF表达人乳铁蛋白含量。为人乳铁蛋白的产业化和商业化提供上游试验藻种和生产工艺条件。方法:（1）构建p CAMBIA2300-35S-GFP-HLF-OCS表达载体,以人乳铁蛋白基因作为电转优化的参考基因,首先采用单因素试验确定转染的转化条件,然后进行电转化正交试验,得到最优的电转化条件。（2）构建p CAMBIA2300-35S-HLF-OCS表达质粒载体,将重组质粒电击转入沙漠小球藻GTD8A1细胞中,通过SDS-PAGE和Western Blot对蛋白进行分析,从而获得转基因藻种GTD8A1-HLF。（3）通过单因素试验确定Plackett-Burman（PB）试验的上下限,然后进行Central Composite Design（CCD）试验,通过RT-PCR和ELISA技术测定在不同培养条件下转基因藻种GTD8A1-HLF的人乳铁蛋白含量,从而获得最适培养条件。结果与结论:1.通过电转优化试验结果表明:最优电转化条件是电压1400V、培养周期8天、渗透剂浓度0.2mol/L、渗透时间为0小时、质粒浓度为6mg/m L、电击缓冲液浓度为0.4mol/L,其细胞致死百分率为51.30%、荧光百分率为52.54%、PCR阳性平均百分率为42.30%。2.试验结果表明:将人乳铁蛋白基因（HLF）电转进入到沙漠小球藻细胞中,通过菌落PCR鉴定后并在相同抗性的液体培养基中扩大培养,基因组DNA和RNA水平分析人乳铁蛋白基因的整合和转录,SDS-PAGE和Western Blot分析获得70k Da的目的蛋白;结果表明人乳铁蛋白的沙漠小球藻表达系统构建成功。3.通过产物优化试验结果表明:最适培养条件为NaCO₃浓度为0.1mol/L、K₂HPO₄浓度为0.02mol/L、NaCl浓度为0.01mol/L、MgSO₄浓度为0.03mol/L、CuSO₄浓度为0.002mol/L、H₃BO₃浓度为0.02mol/L、NaNO₃浓度为0.6mol/L、FeSO₄浓度为0.006mol/L、ZnSO₄浓度为0.002mol/L时,人乳铁蛋白的产量达到51.65 mg/L