利用蓝藻基因工程制备重组人肿瘤坏死因子α:两种不同类型载体的构建及其意义

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TNF能够直接杀伤肿瘤细胞,可成为有前景的抗癌药,但用大肠杆菌得到重组产物后,由于毒副作用大,14年来一直停留在监床实验阶段.研究小组试图以蓝藻为宿主表达rhTNF-α,并已经得到了转基因鱼腥藻,但是表达效率不高,且基因易丢失.该文构建了这两类的载体:广谱型穿梭表达载体和同源整合载体,并采用海洋单细胞聚球藻(Synechococcus sp.PCC7002)作为宿主,以求提高rhTNF-α的表达效率和稳定表达.同时这也是对扩大可以表达外源基因的蓝藻宿主范围的探索.研究小组构建的重组载体pIB02中既有AvaⅠ又有AvaⅡ,而转化所选择的辅助质粒是pRL542,该质粒只能修饰AvaⅡ,这可能是穿梭表达载体尚未转化成功的主要原因.综上所述,同源整合载体的转化效率可能要比穿梭表达载体的转化效率高.
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