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牙鲆(Paralichthys olivaceus)为冷温性、底栖型海水鱼类,是中国、日本和韩国等国家的重要海水养殖经济鱼类。1992年以来,牙鲆人工养殖业发展迅速,山东、河北、辽宁等地大规模开展了牙鲆工厂化、网箱和池塘养殖,其养殖规模不断扩大,而且养殖区域也由北方扩张到南方的浙江、福建、广西等省,取得了良好的经济和社会效益。但是,长期的近亲交配和高密度养殖导致牙鲆种质退化,生长变慢,抗病力下降,导致病害频发,产量下降,给牙鲆养殖产业带来巨大经济损失。传统的鱼病治疗方法主要靠使用抗生素,而抗生素的大量使用不仅会产生药物残留、耐药性和环境污染等问题,而且对消费者的健康也存在潜在的影响。因此,采用现代生物技术,培育抗病力提高的牙鲆新品种迫在眉睫,成为国家和产业发展的重大需求。温度对鱼类的生长、发育、繁殖、摄食、代谢、存活以及分布等生命过程有着直接的影响。长期的进化使鱼类都有了自己的适宜温度范围,在这一温度范围内,鱼类的生长达到最佳状态。许多研究都表明,鱼类的生长与温度具有显著的相关性。有研究表明,牙鲆在水温23℃以上摄食减少,在水温达33℃时,有的成鱼只能短暂存活,南方省份的沿海水温较北方高,即使在北方,工厂化养殖在夏季水温也会达到25℃以上,需要用深井海水降低温度,这无疑增加了养殖成本。因此,研究高温对牙鲆的耐受限度及其分子机理,培育耐高温品系以及品种,不仅可以降低养殖成本,也对探索南北接力养殖新模式具有重要的参考意义为了筛选出抗迟钝爱德华氏菌和耐高温的牙鲆家系,本文以近几年我们选育出的牙鲆抗病和快速生长家系以及从韩国引进的选育群体为亲本建立的2013年牙鲆家系56个,并对其中32个家系进行了迟钝爱德华氏菌人工感染实验。确定了迟钝爱德华氏菌对牙鲆家系的半致死浓度LD50为3.69×105CFU/mL后,从每个家系中随机抽取75尾,按照0.2mL/10g体重腹腔注射半致死浓度的菌液,并设置1次重复。人工感染时水温控制在(19±1)℃。从32个家系中共选取4800尾5月龄牙鲆幼鱼进行感染,16天实验结束后统计各家系存活率为8.2~66.1%,平均存活率为31.2%。不同家系对迟钝爱德华氏菌的抗感染能力表现出显著差异(P<0.05)。筛选出6个存活率高于45%的抗病家系,发现2007年筛选出的抗鳗弧菌病家系F0768的后代家系在迟钝爱德华氏菌感染后的存活率普遍很高,表现出抗迟钝爱德华氏菌的能力。本研究为选育抗鳗弧菌和抗迟钝爱德华氏菌的牙鲆优良品系奠定了基础,对牙鲆抗细菌病的分子机理研究及抗病新品种选育具有重要意义和应用价值;从2012年建立的15月龄的牙鲆家系中抽取21个牙鲆家系用于耐高温实验,每个家系随机抽取牙鲆各18尾,暂养3天待实验鱼状态稳定后开始实验。按照1.5℃/d的升温速度升温,达到温度后保持温度恒定。每2h观察一次,记录每个家系实验鱼的体色变化、活动力大小、摄食强弱和死亡时间等信息,及时捞出死鱼,测量其全长(从吻端到尾鳍末端)、体重,并剪取鳍条保存,90h后实验结束,记录每个家系的存活数目,测量存活鱼的全长和体重。在32℃的高温胁迫下,21个家系的存活率在0~47.1%之间,平均存活率19.3%,其中,F1244、F1247、 F1210、F1242、 F1244和F1259这5个家系存活率大于35%,明显高于其他组,将其定义为耐高温家系,而F1255、 F1225和F1230这三个家系则全部死亡,死亡率达到了100%,将存活率小于10%的家系定义为热敏感家系。耐高温家系平均存活率为43.2%,而热敏感家系只有0.041%,两者差异极显著(P<0.01)。本次实验筛选到了5个耐高温家系,发现F0719的后代家系耐高温性能良好,与本实验室培育的牙鲆生长快速新品种“鲆优1号”F09121和F09125杂交后代耐高温性能表现优良,对牙鲆耐高温品系的选育具有重要意义。