鸡红细胞不仅是血液循环中最丰富的细胞,同时参与机体的免疫反应。转录因子核因子κB（NF-κB）通路在机体感染病毒后的炎症反应中起着至关重要的作用,但对于感染了LPAIV H9N2和大肠杆菌的鸡红细胞中NF-κB通路和其他免疫相关基因尚未广泛研究。该研究通过探究禽流感病毒H9N2亚型和大肠杆菌与鸡红细胞之间的相互作用,并进一步鉴定体内和体外感染H9N2和大肠杆菌的鸡红细胞在不同时间段内重要NF-кB通路基因、淋巴细胞抗原基因和其他免疫相关基因的m RNA表达,以明确红细胞在鸡体免疫中的作用。本研究通过间接免疫荧光,透射和扫描电子显微镜分别确定LPAIV H9N2和大肠杆菌与体内和体外鸡红细胞的相互作用。对My D88和TRAF6免疫相关基因进行免疫组织化学（IHC）研究,通过转录组测序发现在感染过程中的差异表达基因,并用实时定量PCR（q RT-PCR）验证My D88（髓样分化主要反应88）,CCL5（CC趋化因子配体配体5）,MDA5（黑素瘤分化相关蛋白5）IKBKE（抑制核因子κB激酶亚基ε）,NFKBIA（NF-κB抑制剂α）,NFKBIE（NF-κB抑制剂ε）,IFN-α（干扰素α）,CSF3（结肠刺激因子3）,TRAF6（肿瘤坏死因子受体-相关因子6）,淋巴细胞抗原75,LY6E,LY86和LY96分别在体外感染H9N2后0、2、6、10 h和体内感染不同时间间隔3、7和14天的m RNA表达差异,以及在体外感染大肠杆菌后0、0.5、1、2 h和体内感染第1、3、7天的m RNA表达差异情况。间接免疫荧光、透射电镜以及扫描电镜结果表明,红细胞与LPAIV H9N2和大肠杆菌之间存在明显的互作。IHC结果证实了My D88和TRAF6在感染组织中的表达。本研究通过转录组测序评估了感染H9N2的红细胞中存在的差异表达基因分别为:2小时（879 DEG’s 412↑和467↓）和7天（2550 DEG’s 1129↑和1421↓）。定量结果显示NF-κB通路基因(NFKBIA,IKBKE,NFKBIE,IFN-α,My D88,MDA5,CCL5,TRAF6,CSF3和淋巴细胞抗原基因（LY6E,LY75,LY86,LY96）在感染LPAIV H9N2（体外0、2、6、10 h,体内第3、7和14天）以及大肠杆菌（体外0、0.5、1、2 h,体内第1、3、7天）都呈现较强的免疫应答。本研究通过体内和体外试验为鸡红细胞与H9N2和大肠杆菌的相互作用提供了有利证据,鸡红细胞可以组成性表达NF-κB通路基因（NFKBIA,IKBKE,NFKBIE）,淋巴细胞抗原基因（LY6E,LY75,LY86,LY96）以及其他免疫调节基因（IFN-α,My D88,MDA5,CCL5,TRAF6,CSF3）,并根据最近的组学研究提出有核红细胞可能在免疫反应中具有直接作用。研究结果可能为家禽疾病的防治提供新的研究方向,并通过免疫应答途径中的候选基因寻找针对家禽疾病病原体的治疗性干预措施。