【摘 要】
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该文用PCR方法克隆了野生鲑鱼、养殖鲑鱼的降钙素基因,并应用体外克隆PCR的方法首次克隆出鲈鱼、六线鱼降钙素的部分基因序列,通过对克隆的降钙素序列的比较研究,结果显示同
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该文用PCR方法克隆了野生鲑鱼、养殖鲑鱼的降钙素基因,并应用体外克隆PCR的方法首次克隆出鲈鱼、六线鱼降钙素的部分基因序列,通过对克隆的降钙素序列的比较研究,结果显示同一科的鱼降钙素序列保守性较高,同时,根据降钙素的部分氨基酸序列进行了降钙素相似性的比较研究,结果显示在分类学上,分类地位较远的鱼,其降钙素相似性较低,分类地位越接近的鱼,其降钙素相似性越高;我们利谷胱甘肽S-转移酶(Glutathions S-transferase,GST)融合表达载体pGEX-4T-X对克隆的鲑鱼降钙素基因进行了融合表达研究,实用表达PCR的方法对降钙素基因的独立表达进行了初步的研究探索,并将纯化的融合蛋白(GST-sCT)作为抗原,获得了高效价的兔抗鲑鱼降钙素免疫血清;生物活性研究表明,大肠杆菌表达的融合蛋白(GST-sCT)具有显著的降血钙作用.该研究结果为降钙素基因工程进一步研究和降钙素的应用提供了系统的实验证据.
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