论文部分内容阅读
阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种病因不明的致死性神经类疾病,病理标识为神经元普遍死亡,神经递质分泌异常,淀粉样蛋白过度集聚,认知和记忆功能恶化,并伴有各种精神和行为障碍。茶叶单体成分L-茶氨酸在结构上是神经递质L-谷氨酸类似物,其对神经系统的保护作用被广泛报道。但许多研究都集中报道L-茶氨酸通过抑制谷氨酸的兴奋性毒性从而保护神经系统。本文主要从Aβ在体内的集聚及代谢和抗氧化作用两个方面探讨L-茶氨酸对早期阿尔茨海默病的干预作用,所取得的主要研究结果如下:1.通过建立Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤模型,探讨L-茶氨酸对Aβ25-35诱导PC12细胞毒性损伤的影响。结果发现加药浓度为100μM时,L-茶氨酸对PC12细胞的存活率无明显的影响;Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的最佳浓度为50μM;L-茶氨酸通过提高SOD酶活力,降低MDA含量,拮抗Aβ25-35诱导的神经毒性,提高PC12细胞抵抗Aβ25-35氧化损伤的水平。2.以快速衰老小鼠SAMP8为动物模型,在灌胃L-茶氨酸(10 mg·kg-1·d-1)90 d后,检测脑组织匀浆中SOD、GSH-Px等氧化指标的水平,以及Aβ42、脂褐素、AGEs和神经递质DA、ACH的含量。结果显示,与对照组小鼠SAMR1相比,SAMP8组小鼠的脑组织受到了不同程度的损伤:脑组织中有Aβ42、脂褐素及AGEs沉积,SOD、CAT、GSH-Px的活性降低,MDA含量显著升高,皮层神经递质分泌出现异常。灌胃L-茶氨酸后,明显降低了SAMP8小鼠脑组织中Aβ42、脂褐素及AGEs的沉积,提高了神经元的抗氧化能力,改善了神经递质分泌的水平。3.通过观察SAMP8小鼠脑组织的病理染色结果和细胞超微结构,发现模型组小鼠皮层和海马神经细胞的尼氏体、髓鞘及细胞器产生异变,细胞发生凋亡。灌胃L-茶氨酸后,改善了模型组小鼠神经元尼氏体和髓鞘等细胞器的畸变,减少了皮层和海马Aβ42斑块数量,降低了神经细胞的凋亡数量。4.采用RT-PCR检测脑皮层βAPP、PS1、BACE1、ADAM10、IDE基因的相对表达量,并用PCR检测脑海马βAPP、PS1、IDE基因的表达,Western Blot检测脑皮层4G8、UPS、4-HNE、P62、RAGE、BACE1蛋白的表达量。结果显示,与对照组小鼠SAMR1相比,SAMP8组小鼠脑皮层及海马BACE1、βAPP和PS1基因的表达显著上调,脑皮层4G8、UPS、4-HNE及RAGE蛋白的表达量显著增加;而灌胃L-茶氨酸后,显著下调模型组小鼠脑皮层及海马βAPP和PS1基因的表达,降低脑皮层4G8、UPS、4-HNE及RAGE蛋白的表达量。