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第一部分孕期咖啡因暴露对子代生长发育的影响目的:研究孕期咖啡因暴露对胎儿生长发育及子代体重的影响方法:实验组孕鼠从妊娠第3.5~19.5天给予咖啡因皮下注射(20mg/kg,twice a day)。对照组给予相同体积生理盐水。部分孕鼠于孕第20.5天剖腹取胎鼠,称量胎鼠脑重、体重。另一部分自然分娩后,哺乳期内均给予正常饮食,幼鼠母乳喂养。第14天称量脑重和体重。剩余的子代断奶后给予正常饮食直至5月龄。结果:1)孕期咖啡因暴露组胎鼠的体重明显低于对照组而两组间脑重无明显差异;相对于对照组,咖啡因胎鼠的脑重/体重明显升高2)孕期咖啡因暴露组第14天子代脑重和体重均明显低于对照组,脑重/体重比两组间无明显差异。结论:孕期咖啡因暴露影响胎鼠及新生鼠的脑发育并且可导致宫内生长受限的发生。第二部分孕期咖啡因暴露对子代成年大鼠学习记忆的影响目的:研究孕期咖啡因暴露对成年大鼠子代学习记忆的影响。方法:实验组及对照组孕鼠的成年子代按性别分为孕期咖啡因暴露子代公鼠、孕期咖啡因暴露子代母鼠、对照组子代公鼠和对照组子代母鼠。采用Morris水迷宫方法检测各组的空间学习记忆能力结果:孕期咖啡因暴露的子代公鼠和母鼠在定位航行实验中到达平台的所需要的时间和路程均较对照组的公鼠和母鼠要长;搜索实验中,孕期咖啡因暴露组穿越平台所在象限的次数均较对照组对应性别子代要少。结论:妊娠期咖啡因暴露可显著降低成年子代的学习记忆能力第三部分孕期咖啡因暴露对成年子代海马腺苷受体及PKA通路的影响目的:经由分子生物学的手段研究孕期咖啡因暴露成年子代大鼠海马腺苷受体以及下游PKA通路的影响方法:取实验组和对照组的胎鼠和成年子代的海马组织,RT-q PCR方法检测CREB、BDNF、Tr KB信使RNA的表达,ELISA方法测定A1R、A2a R、c AMP、PKA-Cβ、PKA-Cα、p-CREB、BDNF以及Tr KB蛋白的表达结果:1)孕期咖啡因暴露的胎鼠CREB、BDNF和Tr KB的m RNA的表达均明显低于对照组胎鼠,A1R、PKA-Cβ、BDNF以及Tr KB蛋白表达水平在孕期咖啡因暴露的胎鼠海马中显著低于对照组;蛋白A2a R、c AMP、PKA-Cα和p-CREB在胎鼠海马中的表达两组间无统计学差异;2)孕期咖啡因暴露的成年子代海马CREB和BDNF的m RNA的表达均明显低于对照组胎鼠,Tr KB的m RNA含量在咖啡因暴露的成年子代海马中明显高表达;孕期咖啡因暴露成年子代海马的A1R、PKA-Cβ以及BDNF蛋白表达量显著低于实验组,而Tr KB蛋白表达高于实验组,同时蛋白A2a R、PKA-Cα、c AMP和p-CREB的表达在两组间无明显统计学差异。结论:孕期咖啡因暴露可引起子代海马腺苷1受体表达降低,下游PKA-Cα、PKA-Cβ、CREB、BDNF以及Tr KB的改变对学习记忆起着重要作用。