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【目的】评价左氧沙星与磷霉素联用对金黄色葡萄球菌的联合抗菌效应。了解左氧沙星单用及与磷霉素联用的杀菌曲线特点。研究左氧沙星单用及其与磷霉素联合使用对金黄色葡萄球菌的防耐药变异浓度(MPC)的变化。在以上研究的基础上,通过金黄色葡萄球菌感染的兔组织笼模型探讨用PK/PD参数预测金黄色葡萄球菌的体内耐药变异。【方法】(1)采用棋盘法设计,微量肉汤稀释法测定不同浓度组合的抗菌药物对15株甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)和15株甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)的最低抑菌浓度(MIC),并计算联合抑菌指数(FICI)判定联合效应。(2)选取3株MSSA ATCC29213.临床分离菌SA99、SARN450(实验室菌株)和1株临床分离的MRSAB6177,采用菌落计数法对不同浓度的左氧沙星或磷霉素单用及两药联合对3株MSSA和1株MRSA进行体外杀菌实验。(3)采用琼脂二倍稀释法测定左氧沙星及磷霉素对10株MSSA和10株MRSA的MIC和防耐药变异浓度,计算耐药变异频率,然后联合两种药物采用琼脂稀释法测定对上述菌株的MPC,计算耐药变异频率和选择指数(SI=MPC/MIC)。(4)建立金黄色葡萄球菌感染的兔组织笼模型,选取MIC相同(0.125μg/ml), MPC不同的2株临床分离的金黄色葡萄球菌SA99、SA6648(分别为0.6,1.8μg/ml)在兔组织笼中造成感染,每组21只家兔,分别给予不同剂量的左氧沙星灌胃治疗5天,每日给药前和给药后2、4、6、8、10h抽取兔组织笼内的组织液,采用HPLC法测定组织液中左氧沙星药物浓度,进行药代动力学测定,计算PK/PD参数,监测耐药菌的产生及耐药变异频率。【结果】(1)左氧沙星与磷霉素联合用药后,对金黄色葡萄球菌的MIC5o显著降低,FICI分布：15株MSSA的FICI分布：FICI≤0.5占40%；0.5<FICI≤4占60%；FICI>4为0。15株MRSA的FICI分布：FICI≤0.5占73.8%：0.5<FICI≤1占26.2%；FICI>4为0。(2)左氧沙星的杀菌曲线表现出浓度依赖性,磷霉素的杀菌曲线表现出非浓度依赖性。两药1／4MIC浓度单用时虽然均无法抑制MSSA的生长,而两药亚抑菌浓度联合使用后即表现出协同效应和杀菌效应。两药4MIC.8MIC联合时对MRSA表现出杀菌效应。(3)左氧沙星与磷霉素单用对10株MSSA和10株MRSA的MPC/MIC分别是4-64,4～16,联合用药后MPC/MIC分别是2～4,1～4。联合用药较单独用药MPC/MIC下降2～16倍,耐药频率较前下降10～102。(4)1)SA99组动物共有11只分离出耐药株,SA6648组有13只分离出耐药株。2)当两组AUC/MPC分别大于21.4、18.2,Cmax/MPC分别大于1.7、1.12时,可以在将细菌清除同时避免耐药变异株产生,低于上述值时有耐药变异体产生。当药物浓度在整个给药期间低于MIC时无耐药变异产生。3)耐药变异体的靶位变异位点主要是grlA基因的ser80-phe位点突变和gyrA基因的Ser84→Leu突变。AUC/MPC、Cmax/MPC比AUC/MIC、Cmax/MIC在预测金黄色葡萄球菌对左氧沙星耐药时更稳定,更准确。T>MPC、Tmsw与左氧沙星耐药变异产生的关系不确定。[结论]体外左氧沙星与磷霉素联用对30株金黄色葡萄球菌主要为协同和无关作用。亚抑菌浓度的左氧沙星与磷霉素联合对MSSA即可出现协同杀菌效应。左氧沙星联合磷霉素对MRSA也表现出显著的杀菌活性。联合用药较单独用药对金黄色葡萄球菌可以缩小MSW,减少耐药菌产生。以MPC为基础的PK/PD参数比以MIC为基础的PK/PD参数更适合预测金黄色葡萄球菌对左氧沙星的耐药变异。