先前发现利用小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)进行重编程中伴随间质-上皮转化(MET)；并阐明了重编程因子通过抑制TGF-β通路，从而抑制上皮-间质转化(EMT)，Klf4具有刺激上皮细胞标识基因E-cadherin表达的作用，从而驱动MET发生；抑制MET过程抑制重编程发生，而促进MET过程提高重编程效率，并可建立无Sox2的iPSCs。因此MET过程是重编程必需的。为了深入研究这一现象，本论文利用原代分离的小鼠乳腺上皮细胞(MECs)进行重编程研究。第一，原代分离的MECs具有诸多上皮细胞特性，相比MEF细胞具有较高的重编程效率，来自MECs的iPSCs具有多能性。第二，MECs的重编程效率与原代培养以及重编程中的培养体系相关，特别是在低血清并添加抑制TGF-β通路的Alk5抑制剂(Alk5i)的条件下获得最高的效率。第三，MECs在以上不同培养条件下内源Klf4基因表达呈现相对应的特征，即血清抑制其表达，血清添加Alk5抑制剂可以维持其表达，据此发现维持内源Klf4可以实现无外源Klf4的重编程(SO+Alk5i)，这些SO+Alki的iPSCs具有多能性。　　 本论文同时对MET相关的miRNAs在重编程的效应及机制进行了初步研究。已有实验结果显示，第一，miR-200C显著抑制重编程发生，主要通过抑制细胞增殖来实现这一效应。第二，这一效应主要通过其在重编程细胞中上调衰老相关基因p53的mRNA以及蛋白表达实现。第三，miR-200C虽然引起MET(抑制Zeb1和2、刺激E-cadherin表达)，但其刺激细胞衰老的效应对重编程的影响占据主导作用。第四，利用p53缺失小鼠的尾尖成纤维细胞(TTF)研究发现，miR-200C的抑制细胞衰老效应消失，对重编程不再呈现抑制作用。本论文通过对MET相关miRNA的研究，发现了在重编程中MET过程与细胞衰老之间存在密切的调控关联。　　 本论文同时利用从小鼠乳腺原代培养分离的乳腺成纤维(MaF)细胞进行了重编程研究。已有实验结果显示，第一，MaF细胞对Vc和Alk5i具有与MEF相似的敏感性；相比MEF的四因子(SKOM)重编程，MaF体现出对Vc更加敏感。第二，来自MaF细胞的前体诱导重编程细胞(pre-iPSCs)在Vc处理后体现出迅速转变为完全的iPSCs的效应。第三，Vc处理转变后的MaF的iPSCs具有多能性。第四，早期SKOM+Vc的MaF的iPSCs克隆的状态不稳定，Vc有助于其状态维持。因此，本论文发现原代培养获得的MaF细胞体现了对Vc独特的敏感性，特别有利于研究Vc对重编程的效应以及机制。　　 综上所述，本论文在深入探究重编程中MET分子机制的同时，初步发现了MET与细胞衰老在miRNAs调节水平的密切关联，并意外发现了MaF细胞在重编程中对Vc的独特敏感性。这些工作将继续推动实验室在重编程分子机制研究中对MET过程和Vc的机制的深入工作。