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应用DNA重组技术，分别将E.tenella TA4基因和鸡白介素-2以及它们的串联克隆到原核表达载体中，并转化宿主菌BL21。通过IPTG诱导，在大肠杆菌中进行表达。SDS-PAGE电泳显示，分别在25KD、22KD、42KD左右有重组表达蛋白出现。超声波破碎后，包涵体蛋白被纯化，同样SDS-PAGE电泳发现TA4表达蛋白主要在包涵体中，而其他的两种表达蛋白在上清和包涵体中都较高。 应用MTT比色法检测重组蛋白刺激耐过柔嫩艾美耳球虫鸡脾脏淋巴细胞的增殖能力。本实验结果表明：重组pET32-IL-2、pET28-TA4和pEt28-TA4-IL-2表达蛋白(上清和包涵体)都能够明显地刺激耐过鸡脾脏淋巴细胞增殖。其中串联表达产物刺激效果最好，为我们选择TA4作为球虫基因疫苗候选者及IL-2作为免疫增强剂提供了重要依据。 分别构建pcDNA3.1bTA4、pcDNA4.0CIL-2和pCDNA3.1bTA4-IL-2 DNA疫苗重组质粒。将这三种DNA疫苗胸部肌肉注射到鸡体内，通过RT-PCR方法分别检测TA4和IL-2基因表达情况，通过Western blot检测基因串联表达蛋白和TA4基因表达蛋白情况。结果表明：通过RT-PCR方法分别检测到注射部位肌肉中有目的基因的转录，通过Western blot方法检测到基因串联表达蛋白和TA4表达蛋白。 用构建的DNA疫苗pcDNA3.1bTA4-IL-2、pcDNA3.1bTA4、pcDNA4.0cIL-2及其相应的重组蛋白分别于17、24日龄胸部肌肉进行免疫，于31d攻柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊10万／只。分别观察盲肠病变记分、每克粪便卵囊排出数和体增重情况。结果表明：攻虫后免疫组平均增量与感染非免疫组差异显著(P＜0.05)，但与非感染非免疫组无显著差异(p＞0.05)。感染非免疫、pET-TA4表达蛋白、pET-IL-2表达蛋白、pET-TA4-IL-2表达蛋白、pCDNA-TA4重组质粒、pcDNA-TA4-IL-2重组质粒、pcDNA-IL-2重组质粒组相对增重分别是68.15％、96.5％、87.4％、81.9％、90.4％、97.3％、93.7％；pET-TA4表达蛋白、pET-IL-2表达蛋白、pET-TA4-IL-2表达蛋白、pcDNA-TA4重组质粒、pcDNA-TA4-IL-2重组质粒、pcDNA-IL-2重组质粒组卵囊减少率分别是61.1％、71.6％、58.1％，68.7％、75.1％、66％；盲肠病变平均记分结果为感染非免疫、非感染非免疫、pET-TA4表达蛋白、pET-IL-2表达蛋白、pET-TA4-IL-2表达蛋白、pcDNA-TA4重组鸡柔嫩艾英耳球虫免疫调节型。琳疫苗解DNA-工内‘IL一的研究质粗、讲DNA.TA4-IL-2重组质粒、讲DNA.IL一2重组质拉组记分值分别是3 .5、O、1 .1、0.5、1 .3、0.6、0.4、1 .6，感染非免疫组与免疫组、非感染非免疫组差异显著(尸切.05);杭球虫综合指数评佑结果，pET-毛“表达蛋白、pET-IL一表达蛋白、pE’r-TA4-IL一2表达蛋白、讲DNA.TA4重组质拉、peDNA-TA4一IL一2重组质粒、peDNA.IL一重组质拉组评佑位分别足185、182、177、183、192、176.综合以上结果，我们构建的疚苗都具有一定的保护作用，其中peDN戌口“一IL一2保护性效果最好.