银合欢种质资源遗传多样性的AFLP分析

来源 :华南热带农业大学 海南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ch101732
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银合欢起源于中美洲,现广泛分布于世界的热带和亚热带地区,用途广,被誉为“奇迹树”。本研究旨在分析银合欢种质遗传多样性的基础上,探讨不同来源银合欢种质间的关系,寻找遗传差异,为银合欢种质资源的评价、分类、利用和选育种提供理论依据。对中国热带农业科学院热带品种资源研究所从泰国、美国夏威夷、墨西哥、菲律宾、哥伦比亚和中国引进的42份银合欢种质进行AFLP分析。主要研究结果如下:⑴银合欢叶片富含多糖,严重干扰DNA的抽提并影响其后的AFLP双酶切及扩增反应,本研究对银合欢叶片DNA提取进行较深入的研究,找到一种获得高质量DNA的CTAB改良法,用此法获得的DNA完全适合于银合欢AFLP分析。⑵以形态学差异较大的2份银合欢种质为试验材料,从鼎国试剂盒(EcoRI/MseI型)64对引物中,筛选出12对多态性高的AFLP引物组合,并优化了银合欢种质资源遗传多样性研究中AFLP技术的各项参数,推荐用于银合欢种质遗传多样性分析。⑶利用E-ACC/M-CTC、E-ACG/M-CTT、E-ACC/M-CAA这3对AFLP引物组合,对42份银合欢种质的基因组DNA进行扩增,得到125条清晰可辨的谱带,平均每对引物产生42条谱带。其中17条带为所有材料共有,占14.29%,108条为多态性带,平均多态性百分比为85.71%,从DNA分子水平显示出银合欢具有丰富的遗传多样性。⑷根据42份银合欢种质的DNA扩增结果进行UPGMA聚类分析,获得聚类树状图,其相似系数在0.70~0.97之间,表明42份银合欢种质之间遗传关系相对来说比较近。依相似系数0. 80的水平,可将供试的42份银合欢种质分为7个类群。结合各种质间的遗传距离对其遗传多样性进行分析,揭示了供试材料间遗传背景的相似性及复杂性。⑸对热研1号新银合欢、埃握雷克斯银合欢、C.Levw584银合欢、K132银合欢进行AFLP分析及关键形态特征分析,发现单凭形态特征无法探讨银合欢种质资源的遗传多样性,但形态学标记可作为辅助手段。
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