金黄色葡萄球菌临床流行病学和耐药性研究及万古霉素异质性耐药株筛检

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目的分析2008年~2011年间我院金黄色葡萄球菌分离情况及耐药性变迁,以指导临床合理应用抗生素;了解异质性耐万古霉素金黄色葡萄球菌(h-VISA)的存在状况,筛选简便可行的h-VISA的检测方法,为临床实验室常规检测h-VISA提供基础资料。方法对我院2008年~2011年间分离的1096株金黄色葡萄球菌的药敏试验结果、科室及标本来源等临床资料进行统计处理,分析其感染情况、耐药现状及临床分布规律。从2010年~2011年间实验室内金黄色葡萄球菌保存菌株中随机挑选113株,分别采用K-B法、琼脂稀释法和E-test法对其进行检测,筛选出可疑h-VISA菌株用菌谱分析法进行确认,同时对文献推荐的几种试验方法的筛选效果进行比较。结果2008年~2011年间从50774份临床各类标本中共分离出金黄色葡萄球菌1096株,总分离率为2.16%;其中694株为耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA), MRSA所占比率为67.25%;需要引起注意的是2008年MRSA所占比率为74.40%,2011年只占50.00%,总体呈现下降趋势;但是凝固酶阴性葡萄球菌的分离率却呈上升趋势,表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌的分离率,从2008年的0.09%和0.00%上升到2011年的0.87%和0.05%。研究期间金黄色葡萄球菌对万古霉素的非敏感率为0.21%,虽然经过确认为实验误差,但通过试验二异质性耐万古霉素金黄色葡萄球菌的分离及检测方法筛选检测到1株对万古霉素的MIC3μg/ml和2株MIC4μg/ml的MRSA,疑为万古霉素敏感性减低的金黄色葡萄球菌,其中一株MIC4μg/ml的MRSA表现出明显的对万古霉素的异质性耐药,经菌谱分析法证实为h-VISA,本次113株试验菌株h-VISA的检出率为0.88%。结论1.2008年~2011年金黄色葡萄球菌的分离率有所下降,主要是由于标本量逐年增加而检出的金黄色葡萄球菌的数量除2009年略有增加外,均呈递减趋势;而表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌的分离率则呈现上升趋势。2.研究期间金黄色葡萄球菌中MRSA的构成比呈下降趋势,从2008年的74.40%下降至2011年的50.00%,但总体来说,MRSA占据金黄色葡萄球菌一半以上。3. MRSA中已出现万古霉素敏感性减低菌株,分离出一株h-VISA, h-VISA在万古霉素选择性压力的作用下可以突变为VISA,一旦此种压力去除,VISA又可以恢复为h-VISA,由于VISA具有不稳定性,而h-VISA的耐药性则相对稳定,所以临床上分离出的h-VISA株会在患者之间相互传播蔓延,引起医院感染,并且造成临床用万古霉素治疗感染失败,危害极大。可见MRSA对万古霉素的异质性耐药,更应引起国内临床微生物检验工作者和临床医生的的广泛重视。4.K-B法并不是检测h-VISA的理想方法,而菌谱分析法则较为有效,分离率为8.3%,且在本实验中灵敏度可达10-8。5.本次研究分离的一株h-VISA,其MIC为4μg/ml,用CLSI推荐的6μg/ml万古霉素琼脂筛选平板未能筛检出,对6μg/ml万古霉素琼脂筛选平板筛选万古霉素敏感性减低菌株能力需要做进一步深入观察。
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