【摘 要】
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美国疾病控制中心于1981年在美国首先发现获得性免疫缺陷综合症(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS),此后20多年,艾滋病在全世界迅速蔓延,已有3000多万人死于艾滋病。
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美国疾病控制中心于1981年在美国首先发现获得性免疫缺陷综合症(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS),此后20多年,艾滋病在全世界迅速蔓延,已有3000多万人死于艾滋病。
目前已获准上市的HIV感染治疗药物主要以病毒的逆转录酶和蛋白酶为靶点,具有易产生耐药性、毒副作用强以及价格贵的缺点。寻找作用于HIV新靶点的药物就具有特别重要的意义。本实验主要开展作用于阻断病毒进入细胞的gp41靶点药物的研究。
本研究采用天然药物化学技术与BIA(Biomolecular Interaction Analysis)技术以及体外药效学检测相结合的方法,有针对性地从天然药物BS中提取、分离和纯化有效成分,并通过波谱学的手段对有效单体化合物的结构进行了鉴定。药物提取和分离部分的主要实验方法包括薄层层析(Thin-Layer Chromatography,TLC)、高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)技术和柱层析(Colunln Chromatography),生物活性部分的检测方法主要包括BIA技术和细胞培养,其中细胞培养使用的细胞株为MT-4细胞和MAGI细胞,病毒株为HIV-1 ⅢB,主要实验方法包括p24法、MTT法和MAGI-Assav。通过实验得出结论:BS的60%乙醇提取物在MT-4细胞中比其它浓度的乙醇提取物抗HIV-1作用更好,并以BIA技术和药效学检测作为指标,跟踪提取分离得到了先导化合物R41,并以BIA技术和MAGI-Assay对其进行了初步的作用机理的研究。
本课题采用多种技术相结合的手段,突破了传统的药物研发方法,能较快速地找到针对新靶点的先导化合物,为寻找抗HIV的新药开辟了新途径。
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