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目的:通过分析小鼠肠道菌群失衡前后派氏结(Peyer’s patches,PP)内T淋巴细胞及亚群数量以及细胞因子表达的变化,阐明菌群失衡对小鼠派氏结内T淋巴细胞结构和功能的影响。方法:1.沿用抗生素头孢曲松钠灌胃的方法建立小鼠肠道菌群失衡模型。以头孢曲松钠终浓度为8g/kg/d剂量,连续灌胃8天,建立小鼠重度菌群失衡模型;以头孢曲松钠终浓度为4g/kg/d剂量,连续灌胃4天,建立小鼠轻度菌群失衡模型。2.利用EDTA振荡法去上皮和胶原酶Ⅳ消化法制备正常组、轻度菌群失衡组、重度菌群失衡组小鼠肠派氏结总单细胞悬液。以本管未添加抗体细胞作为阴性对照,调整细胞浓度为106个/管,三联荧光抗体标记流式细胞术检测T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+和调节性T细胞CD4+CD25+的变化,并计算CD4/CD8比值。3.利用RT-PCR法检测正常组、轻度菌群失衡组和重度菌群失衡组派氏结内Th1类淋巴细胞分泌的IL-2、IFN-γ和Th2类淋巴细胞分泌的IL-4、IL-10mRNA表达量的变化。结果:1.与正常组比较,轻度组和重度组派氏结内总CD3+T细胞比例上升(p<0.05),CD4+T细胞比例上升(p<0.05);CD8+T细胞比例下降(p<0.05);CD4/CD8比值升高(p<0.05);CD4+CD25+调节性T细胞比例减少(p<0.05)。2.通过RT-PCR法对各细胞因子mRNA表达量的变化检测,与正常组比较,轻度组和重度组中Th1类细胞分泌的IL-2和IFN-γ的表达量减少,Th2类细胞分泌的IL-4和IL-10的表达量逐渐升高。结论:1.肠道优势菌群失衡导致派氏结内T淋巴细胞构成比例发生变化,其中总T淋巴细胞比例随着失衡程度的加深不断升高,辅助性T细胞比例较失衡前升高,细胞毒性T细胞和调节性T细胞比例降低。2.肠道优势菌群失衡导致派氏结内与体液免疫相关的IL-2和IFN-γ表达量升高,与细胞免疫相关的IL-4和IL-10表达量降低,促使免疫反应向体液免疫方向偏移。