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目的:通过建立羟基积雪草苷(MD, madecassoside)的高效液相色谱测定方法,研究其在大鼠体内的药代动力学参数、组织分布情况以及排泄特点。为MD的开发利用和进一步的临床试验提供理论依据。方法:(1)尾静脉注射MD 14、42和126 mg/kg后,分别于1、3、5、10、20、30、60和120 min采取血浆及各组织;0～2、2～4、4～8、8～12和12～24 h收集尿液及粪便;0～1、1～2、2～4、4～6和6～24 h收集胆汁。(2)取血浆等样品,加入两倍体积的甲醇(含内标葫芦素B 10μg)沉淀杂质和蛋白质,取上清液经固相萃取纯化后进行HPLC检测,采用内标标准曲线法以峰面积比值定量。(3)色谱条件:选用Welchrom-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),水-乙腈(24∶76)为流动相测定药物含量;流速:1.0 mL/min;紫外检测波长:225 nm ;进样量:20μL;柱温:30℃;内标:葫芦素B。结果:(1)在此色谱条件下,MD和内标葫芦素B的保留时间分别为5.11 min和8.14 min。最低检测浓度为1μg/mL。回收率在80.65%～103.7 %,精密度在0.54%～3.62%,均符合生物样品测定要求。(2) MD在大鼠体内的药代动力学符合二室开放模型,单次分别静脉注射14、42和126 mg/kg后,T1/2α分别为2.40、1.96和1.95 min,T1/2β分别为25.62、23.12和25.13 min,Vc分别为0.01、0.02和0.03 mL/mg,CL分别为0.0009、0.0013和0.0021 mL/min/mg,AUC分别为16000.89、32864.89和61200.52μg·min/mL ,MRT分别为36.98,33.37和36.26 min。(3) MD进入大鼠体内后迅速广泛分布于各组织,其中肝、肾和脾组织中的药物含量最高,给药后20 min达高峰,120 min后浓度明显降低。(4) MD主要以原型通过尿液排泄, 24 h通过尿液的排泄量占总给药量的82.86%。通过粪便和胆汁排泄的药物仅分别占给药总量的6.98%和1.53%。药物从大鼠体内排泄的速度较快,在给药后2 h约有78.5%药物已排出。结论:本研究所建立的SPE-HPLC检测方法可用于MD在大鼠体内的药代动力学研究。MD在SD大鼠体内呈二室模型分布,一级动力学消除,半衰期较短,药物在体内广泛分布,分布和消除均较快,主要以原型由尿液排泄。