目的:毛发有许多生理功能,包括抵御紫外线照射,调节体温,引流汗液,触觉感受等。对于人类,毛发在个人形象方面有着重要的作用。各种原因导致的脱发可能不会对生理功能产生明显影响,但会严重影响人们的社交,对患者的心理造成负面作用,严重影响患者生活质量。脱发的治疗一直是近年来的研究热点。脱发可以分为瘢痕性脱发和非瘢痕性脱发。在瘢痕性脱发中,毛囊结构通常被永久破坏,取而代之的是纤维组织。在非瘢痕性脱发中,毛囊结构通常是完整的,其中雄激素性秃发是最常见的一种脱发类型,在病程的早期,毛发周期的改变是主要的因素,其特点是生长期缩短,静止期延长。促进毛囊由静止期进入生长期或者延长毛囊生长期的药物或者治疗手段,均可能改善雄激素性秃发。近年来,光电设备在皮肤科疾病及美容上的应用越来越普及,并且发现其潜在治疗脱发的作用,但是效果有限。探索新的治疗方式成为目前亟待解决的问题。Ito M等人发现小鼠大面积全层皮肤损伤后,在创伤修复的过程中会出现完整的毛囊及皮脂腺的再生。但这种大块创伤在人的身上通常会导致瘢痕生成,所以此方法诱导的毛囊再生并不适合用于临床上,如何通过适当的创伤,诱导皮肤启动修复反应从而促进毛发生长,点阵微针射频是个非常好的选择。点阵微针射频是目前新提出的微创设备,通过微针释放双极射频电流,产生深度、范围可控的热损伤区。毛囊的周期性生长受到多种信号通路的调控,其中Wnt信号通路起到至关重要的作用。Wnt信号通路是一条十分保守的通路,包括3条通道:Wnt/β-catenin通路,Wnt/细胞极性通路以及Wnt/Ca²⁺通路,其中Wnt/β-catenin通路为经典通路。若敲除成年小鼠静止期的毛囊干细胞中的β-catenin或Wntless,则毛囊停止在静止期,不能进入生长期,提示了Wnt/β-catenin激活对毛囊周期性再生的重要作用。近年来,越来越多研究发现毛囊生长与炎症反应及免疫细胞密切相关。有研究表明,炎症细胞特别是巨噬细胞在创伤诱导毛发进入生长期的过程中起到关键作用。点阵微针射频通过释放能量到靶组织,可以产生皮肤微小的热损伤带,坏死凝固的组织引发局部炎症反应,启动皮肤的创伤修复机制,点阵微针射频可能通过诱发局部炎症反应促进毛发进入生长期。本研究旨在研究点阵微针射频对于毛发生长的影响及其作用机制,并通过临床实验观察其联合米诺地尔外用的临床疗效及安全性。研究方法:健康雌性7周龄C57BL/6J小鼠剃毛后,在小鼠背部皮肤分区用不同能量（6W、8W、10W、12W、14W）及不同输出时间（100ms、200ms、300ms）组合以确定最佳参数。之后使用选出的最佳参数对30只小鼠的背部皮肤进行微针点阵射频治疗,并拍照记录小鼠毛发生长情况。在治疗前、治疗后1天、3天、5天、7天、9天、11天及13天颈椎脱位法处死小鼠,并取材备用,进行后续实验。通过HE染色观察毛囊镜下生长情况,免疫荧光染色观察毛囊干细胞激活情况。PCR Array技术筛选、实时荧光定量PCR及免疫组化染色分析Wnt信号通路的变化情况。采用实时荧光定量PCR检测不同时间点炎症因子Ccl2、iNOS、Arg1的m RNA表达水平,免疫组化染色观察皮肤F4/80阳性巨噬细胞表达情况,并观察点阵微针射频对于抑制炎症反应的小鼠模型及去除巨噬细胞的小鼠模型的作用。招募19名22-55岁明确诊断为雄激素性秃发的男性患者,将受试者脱发区域的皮肤平均划分为左右2个区域,随机分为联合治疗侧和单独外用药侧,联合治疗侧每月进行1次点阵微针射频治疗,共计5次,受试者每日早晚脱发区域涂抹5%米诺地尔酊。采用客观指标——毛发密度及直径、医生对效果的主观评价、受试者对效果的满意度评价及不良反映评估,评估点阵微针射频治疗雄激素性秃发的的疗效及安全性。结果:不同能量及不同输出时间的组合下治疗小鼠,发现能量为10W,输出时间为200ms时,背部治疗区域毛囊最先进入生长期,且最先长出毛发。我们选择10W能量,输出时间为200ms的治疗参数对小鼠进行点阵微针治疗,发现第9天小鼠背部部分皮肤开始变成灰色,15天长出毛发,18天时背部毛发基本全部长出。HE染色可见,第5天,毛乳头体积增大;第7天毛乳头接近真皮与皮下的交界处;第9天毛乳头进入皮下,毛母质细胞明显增多,包绕于毛乳头上部;第11天可见毛乳头大部分被毛母质细胞环绕,明显可见毛乳头上方出现黑素颗粒;第13天可见毛乳头深入皮下组织,大量黑素颗粒,并出现毛干。对小鼠毛发长度定量分析发现,毛发长度在治疗后9天开始逐渐增加,且有统计学差异（P<0.05）。免疫荧光结果显示,在术后7天毛芽处出现BrdU⁺细胞,术后9天毛囊隆突部出现BrdU⁺细胞,术后11及术后13天,可见大量BrdU⁺细胞,主要分布于毛囊外毛根壳及毛母质细胞。治疗前及治疗后5天小鼠皮肤Wnt信号通路PCR Array共筛选出显著上调的基因5个,显著下调的基因1个。经实时荧光定量PCR验证,点阵微针治疗后5天与治疗前比,Porcn、Bcl9基因的表达水平增高（P<0.05）。免疫组化结果显示,治疗后7天及14天β-catenin与Lef1蛋白表达高于治疗前。腹腔注射地塞米松可以抑制点阵微针射频治疗后毛发生长的现象。免疫组化染色结果显示治疗后三天,治疗区域皮肤F4/80阳性巨噬细胞数量增加,实时荧光定量PCR显示,M1型巨噬细胞标记物（iNOS）m RNA水平明显增高,炎症因子Ccl2、Tnf-α,Ιl-1βm RNA的水平在术后均明显增高（P<0.05）。氯磷酸盐脂质体去除小鼠体内巨噬细胞发现点阵微针射频治疗后毛发生长的现象消失。点阵微针射频联合米诺地尔外用比单独外用米诺地尔治疗男性型秃发效果更明显。5次治疗后,可以达到较好的临床效果,毛发数目、毛发密度、医生评分及患者满意率均增高且高于单独外用药治疗侧,无严重的不良反应发生。结论:点阵微针射频可以通过激活毛囊干细胞促进小鼠毛发的生长,Wnt信号通路参与并起到调节作用。抑制炎症反应后毛发生长作用消失,术后巨噬细胞表达增加,相关炎症因子表达增加,去除巨噬细胞后,毛囊生长作用消失,说明点阵微针射频可能是通过炎症反应促进毛发生长,其中巨噬细胞起到重要作用。临床研究表明点阵微针射频联合米诺地尔外用对于男性型秃发是一种安全有效的治疗方法。