驴源马链球菌马亚种分离鉴定及部分生物学特性的研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:skyedge228
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目的:马链球菌马亚种(Streptococcus equi subsp.equi,SEE)为链球菌属C群成员,革兰氏阳性,β溶血性链球菌。可引起马属动物的马腺疫(strangles)疾病,一种急性上呼吸道传染病,是公认世界范围内最常见的马属动物的传染病之一。近几年,随着人们对驴肉、驴奶等产品需求的增加我国驴饲养规模逐年提升。科学养殖、安全防控知识缺乏导致驴感染马链球菌马亚种的病例逐渐增多。2019年新疆石河子地区驴场发生一起疑似马腺疫疫情,为了明确病原,本试验从临床发病及死亡动物采集样本对病原菌进行分离鉴定、遗传进化分析,同时对病原菌的生物学特性、致病性、抗生素敏感性以及常用消毒剂杀菌效果进行研究,旨在为疫病的治疗及防控提供科学的指导和建议。方法:对发病驴场进行临床及病理学观察并从临床感染的动物中采集样本,通过病原菌分离、生化鉴定和PCR鉴定,明确分离株种属;通过Se M基因测序确定分离株基因型,利用DNAstar与MEGA7.0对分离株进行同源性比对和遗传进化分析。测定不同培养条件下分离株的生长特性和溶血特性,PCR检测毒力基因的携带情况,通过小鼠致病性检测驴源分离株的毒力。采用K-B琼脂扩散法测定分离株对16种抗生素药物的敏感性,采用国家消毒剂检测标准测定新洁尔灭、碘伏、来苏尔、84消毒液共4种消毒剂对驴源分离株的消杀效果。结果:2019年4月石河子地区某驴场的驴出现体温升高、精神沉郁、下颌多个脓肿,成年驴发病率50.9%,死亡率3.8%。驴驹发病率46.5%,死亡率9.3%。病理剖检发现鼻腔、肺部、肝脏以及肾脏均有明显脓肿。病理组织学变化可见肝脏充血,肝小叶结构消失,肝索崩解,肾脏严重纤维化及大量化脓灶。细菌分离鉴定,得到4株马链球菌马亚种(SEE),编号分别为XJ201901-201904,基因型均为se M-136,与2018年7月中国山东驴源分离株同源性最为相近为99.4%。分离株在羊血平板上为β溶血,在37℃、p H7、1%Na Cl条件下生长状态最好。对p H6以下酸性环境及高于3%Na Cl环境敏感。驴源SEE分离株均可检测到透明质酸、肽聚糖、纤粘蛋白结合蛋白、重组酶、溶血素S五种毒力基因,腹腔接种小鼠毒力不同,LD50在3×10~3—1×10~6之间,人工感染小鼠出现肝脏及肾脏脓肿,病理组织学变化与自然感染的驴一致。四株驴源SEE分离株对诺氟沙星、卡那霉素、复方新诺明存在耐药,对氯霉素、青霉素、庆大霉素、氨苄西林、多西环素、头孢噻吩等6种药物及推荐使用剂量的新洁尔灭、碘伏、来苏尔、84消毒液敏感。结论:2019年4月新疆石河子地区驴场发生的疑似马腺疫疫情是由基因型为se M-136的马链球菌马亚种所致,该分离株与中国山东驴场马腺疫分离株高度同源,提示新疆地区驴源马链球菌马亚种可能来源中国山东地区,通过引种和动物运输而侵入。四株驴源SEE分离株均对常用消毒剂抵抗力较弱,不耐酸和高盐环境。对诺氟沙星、卡那霉素、复方新诺明存在耐药,对氯霉素、青霉素、庆大霉素、氨苄西林、多西环素、头孢噻吩等6种药物敏感。同时对小鼠表现强毒力,LD50可达3×10~3。研究结果为驴源SEE的治疗及日常防控提供了科学依据。
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