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【研究背景】选择性地调节与SCI发生、发展相关的特异的靶分子是发现SCI治疗新方法的基础。NOS的不同表达水平与SCI继发性损伤的程度密切相关，已有研究用不同的抑制剂改变NOS的表达水平可以达到抑制SCI继发性损伤的作用，因此，NOS可以被认为是可以用于干预治疗SCI的靶分子。当前，多种动物种属的多种组织中的NOS基因已被确定，并可做为对多种相关疾病治疗的靶基因，为从基因水平进行治疗提供了可能。反义寡脱氧核苷酸可以特异地抑制靶基因的表达。 【目的】通过研究不同类型的NOS在损伤后动物脊髓组织中的分布、表达和信号转导通路的改变情况，评价不同类型NOS在脊髓继发性损伤反应中的作用；应用与NOS对应的反义寡脱氧核苷酸(ASODN)改变脊髓损伤后NOS基因的表达，观察对脊髓损伤后神经功能恢复的影响，对脊髓损伤的发生机理和治疗途径做初步的探讨。 【方法】1、制备大鼠脊髓压迫伤模型，分别于大鼠脊髓压迫伤后6、12、24、48、72h等5个时间点，用免疫组织化学和图像分析的方法判断脊髓损伤后不同类型NOS在大鼠脊髓组织中的分布和表达情况，确定何种与脊髓损伤后的继发性损伤有关，并用透射电镜观察细胞凋亡的形态改变；2、p38MAPK信号转导途径在损伤后的改变情况通过信号转导特异性抑制剂SB203580并结合Western blotting方法进行检测；3、根据前两部分的结论，应用与脊髓损伤相关的NOS脂质体介导的反义寡脱氧核苷酸进行动物体内治疗，通过RT-PCR技术检测NOS-mRNA的改变，用分光光度法测定组织中NO含量和NOS活性，观察脊髓损伤后神经功能的恢复情况：包括动物行为学、神经电生理、MRI和病理组织学等指标，伤段脊髓组织细胞凋亡的改变程度通过流式细胞技术进行研究，最后推测NOS在脊髓损伤中的表达特征、作用机理和可能的治疗途径。 【结果】1、免疫组化阳性部位主要分布在脊髓的前角和中央管周围的大多角形细胞以及后角的小圆细胞，脊髓损伤前、后脊髓组织中均有nNOS的持续表达；iNOS在损伤后开始出现，并迅速增加，至12-48h达到高峰，以后开始下降；eNOS损伤前后基本没有明确表达；SCI后可以看到凋亡细胞的超微结构改变。2、SCI后p38MAPK存在明显的变化规律:3Omin时出现明显表达上调，6h达到高峰，以后逐渐下降;应用p38特异性抑制剂SBZo358o可以明显抑制p38MApK活性、NoS活性和NO含量，并减少细胞凋亡的发生率印<0.05)。3、应用AsODN一iNOS、ASODN一nNOS可以抑制相应酶的表达应用，并可以降低组织中的NOS活性和NO含量，ASODN一iNOS可以非常明显地抑制损伤后细胞凋亡的发生印<0.01)，ASODN一nNOS的上述抑制作用较弱印<0.05)。对神经传导功能的恢复前者优于后者。【结论】脊髓损伤后脊髓组织中主要表达iNOS和nNOS，并存在P38MAPK信号转导通路改变和细胞凋亡，脊髓损伤后应用NoS反义核酸可以使脊髓损伤后神经功能得到改善，iNOS活性变化对脊髓损伤的恢复更具决定作用，其作用与对细胞凋亡的抑制有关。