NSE、C-kit、Cx43在慢传输型便秘合并成人巨结肠中的表达及临床意义

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【目的】通过检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、Cajal间质细胞(ICC)特异性标记物C-kit受体、缝隙连接蛋白43(Cx43)在慢传输型便秘合并成人巨结肠不同肠段肠壁中的表达,探讨神经节细胞、ICC、Cx43在慢传输型便秘合并成人巨结肠发病机制中的作用及临床意义。【方法】收集2009年1月至2015年2月期间湖南省人民医院行巨结肠切除、结肠次全切除、结肠直肠下端改良Duhamel吻合术治疗的慢传输型便秘合并成人巨结肠患者的存档石蜡包埋标本共21例,分别取其近远端切缘及扩张段肠壁全层组织,另取10例正常结肠全层肠壁组织作为对照组,所有标本均经10%中性福尔马林固定、常规脱水和石蜡包埋。对每例存档蜡块常规连续切片3张,采用免疫组织化学Eli Vision法分别检测NSE、C-kit、Cx43蛋白的表达情况,在光镜下分别观察神经节细胞、ICC、Cx43阳性细胞在正常结肠和慢传输型便秘合并成人巨结肠不同肠段肠壁的分布状态,计数并进行统计学分析。【结果】1 NSE、C-kit、Cx43表达及组织学观察1.1近端切缘肠壁神经节细胞的形态结构、数量及分布与正常结肠肠壁无明显差别。各类ICC的数量和分布接近正常结肠肠壁。Cx43阳性细胞分布与正常结肠肠壁相似,环形肌层Cx43的表达明显强于纵形肌层和粘膜下层。平均每个高倍镜视野神经节细胞、ICC、Cx43阳性细胞数分别为13.571±2.481、19.29±5.44和52.38±7.32。1.2远端切缘肠壁肌间与粘膜下神经丛明显增粗,在增粗的神经丛区域聚集较多增粗的神经纤维,排列紊乱;肌间神经丛中神经节细胞缺如或稀少,偶见变性的神经节细胞,而粘膜下神经丛中未见神经节细胞。各类ICC数量明显减少甚至缺如,少许IC-MY散在分布在神经丛周围,正常细胞网络消失,偶见环形肌层ICC,彼此间隔较远,连接消失,几乎未见纵形肌层ICC和IC-SM。肠壁各层中Cx43表达显著减少。平均每个高倍镜视野神经节细胞、ICC、Cx43阳性细胞数分别为0.476±0.814、3.05±1.96和3.95±3.46。1.3扩张段肠壁神经节细胞数量减少,主要位于肌间神经丛区域。各类ICC数量较正常结肠肠壁均减少,其中以纵形肌层ICC和IC-SM减少尤为显著;ICC分布差异较大,主要位于肌间神经丛区域,环绕神经丛周围部分连续分布或不环绕神经丛周围分布,不能形成完整的细胞网络。肌间神经丛区域及环形肌层可见Cx43表达,纵形肌层和粘膜下层少见甚至未见Cx43表达。平均每个高倍镜视野神经节细胞、ICC、Cx43阳性细胞数分别为7.000±4.135、9.62±5.31和26.71±9.28。1.4正常结肠肠壁肌间神经丛的形态结构与粘膜下神经丛基本一致,其内神经节细胞清晰可见,彼此形态和体积基本相似,未见神经纤维增粗。肠壁可见丰富的ICC,主要分布在肌间神经丛周围(IC-MY)、环肌层与纵肌层内(IC-IM)和粘膜下环形肌层表面(IC-SM)。其中IC-MY环绕神经丛连续分布,彼此间通过突起相互连接形成细胞网络;IC-IM在肌间隔呈珠帘状分布,紧贴平滑肌细胞平行走形;IC-SM彼此间通过突起相互连接于环形肌层和粘膜下层。Cx43阳性细胞主要分布于肌间神经丛区域和环形肌层,相互连接形成网络状结构;纵形肌层和粘膜下层少见Cx43表达。平均每个高倍镜视野神经节细胞、ICC、Cx43阳性细胞数分别为14.800±1.814、21.30±3.59和55.40±5.68。2不同肠段肠壁NSE、C-kit、Cx43表达比较NSE、C-kit、Cx43在近端切缘肠壁的表达与正常结肠肠壁无显著性差异(P>0.05);NSE、C-kit、Cx43在远端切缘肠壁的表达与正常结肠及近端切缘肠壁比较差异均有统计学意义(P<0.001);NSE、C-kit、Cx43在扩张段肠壁的表达与正常结肠及近远端切缘肠壁比较差异均有统计学意义(P<0.001)。【结论】慢传输型便秘合并成人巨结肠病变肠管NSE、C-kit、Cx43的表达减少,病理改变表现为神经节细胞缺失、ICC数量减少和GJ结构破坏;NSE、C-kit、Cx43的表达有可能成为慢传输型便秘合并成人巨结肠患者手术疗效的评估指标。
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