复方中药制剂干预成纤维细胞增殖活性研究

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目的:观察复方中药制剂丹苓(颗粒)冲剂及其单味生药丹参和石决明对体外培养的兔结膜成纤维细胞增殖的抑制作用,并且进一步探讨药物作用机制,为临床上防治增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)提供新的药物。方法:以体外培养的第四代兔结膜成纤维细胞为主要研究对象,以地塞米松、5-氟尿嘧啶、氢化可的松作为对照,用MTT法测定不同浓度丹苓(颗粒)冲剂及其单味生药作用48小时后,其对于成纤维细胞增殖的抑制作用,同时观察不同药物作用48小时后细胞形态变化特点。用AnnexinV-FITC和碘化丙锭(PI)双染法,在流式细胞仪下测定不同药物及其药物浓度作用不同时间后,成纤维细胞的早期凋亡率及细胞坏死率。用末端脱氧核糖核酸酶介导的dUTP末端标记法(TUNEL法)观察不同药物及其药物浓度作用24小时与48小时后成纤维细胞的凋亡情况。结果:中药丹苓(颗粒)冲剂及丹参在设定浓度下均可抑制成纤维细胞增殖,且成剂量依赖性。石决明在设定浓度下未见明显抑制成纤维细胞增殖的作用。5-氟尿嘧啶、氢化可的松在设定浓度范围内可以抑制成纤维细胞的增殖。地塞米松在低浓度时轻度刺激成纤维细胞的增殖,而在高浓度时可以抑制成纤维细胞的增殖。丹苓(颗粒)冲剂与丹参作用48小时后,部分成纤维细胞不贴壁且收缩成圆形。50mg/mL、100mg/mL丹苓(颗粒)冲剂和3.47mg/mL、27.75mg/mL、111mg/mL丹参作用6小时组与24小时组以及1.56mg/mL丹苓冲剂作用24小时组成纤维细胞早期凋亡率均与正常对照存在显著性差异(P<0.05)。TUNEL法结果显示,不同药物浓度的丹苓(颗粒)冲剂与丹参作用24小时与48小时后,部分成纤维细胞核出现阳性着色,并且可见染色质的浓缩、边集及凋亡小体的形成。结论:中药丹苓(颗粒)冲剂及其单味生药丹参可以通过诱导成纤维细胞凋亡的方式有效抑制成纤维细胞的增殖,有望成为新的防治PVR的药物。
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