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目的:T细胞免疫球蛋白粘蛋白3（T cell immunoglobulin mucin-3，Tim-3）是Tim家族的一员，作为免疫负调控分子对免疫耐受起关键作用，与配体半乳凝素-9(galectin-9)作用可诱导Tim-3+T细胞死亡。肿瘤免疫逃逸是肝细胞癌发病机理中重要的一环，CD1d限制性恒定自然杀伤T细胞(iNKT)与免疫效应细胞相互作用参与肿瘤免疫。已有实验证明Tim-3在慢性感染及肿瘤个体耗竭的CD8+T细胞上表达上调，而最近有研究发现Tim-3/galectin-9信号通路介导乙型肝炎病毒(HBV)相关肝细胞癌(HCC)患者T细胞的功能失调及调控小鼠非酒精性脂肪肝肝脏iNKT细胞的稳态。本研究中我们检测了Tim-3在HBV相关HCC患者外周血和肝组织中iNKT细胞上的表达，以揭示其在HCC的发生发展中的作用。 方法:收集15例手术切除的HBV相关HCC患者癌灶、癌旁组织作为病例组，及7例手术切除的肝血管瘤患者瘤旁正常肝脏组织作为对照组，采用机械研磨法获取肝细胞悬液，经Percoll密度梯度分离肝脏浸润淋巴细胞;同时采集两组患者外周血分析单个核细胞群。标本标记荧光素偶联的CD3、CD4、CD8、Vα24 Jα18 TCR（6B11单克隆系）及Tim-3抗体，在溶血素处理后，经BD FACSAriaⅡ流式细胞仪检测，分析Tim-3在HBV相关HCC癌灶、癌旁组织和正常肝组织及外周血中CD3+iNKT细胞及各亚群CD4+iNKT、CD8+iNKT和(CD4-CD8-) DN iNKT细胞上的表达。 结果: 1 Tim-3在HBV相关HCC癌灶组织中的CD3+、CD4+及CD8+T细胞上表达增高。与癌旁组织及正常肝脏组织比较，Tim-3在癌灶组织中的CD3+、CD4+及CD8+T细胞上表达显著增高（Tim-3+CD3+T细胞:2.729±1.436％ vs.0.729±0.373％和0.600±0.265; Tim-3+CD4+T细胞:3.343±1.976 vs.1.500±0.896％和1.086±0.367％; Tim-3+CD8+T细胞:3.300±1.854 vs.1.300±0.635％和0.657±0.244％,P＜0.05）。 2 iNKT及各亚群细胞频数在HBV相关HCC患者癌灶、癌旁组织和肝血管瘤患者正常肝脏组织及在这两组外周血中的变化。癌灶组织中CD3+iNKT细胞频数较癌旁组织和正常肝脏组织中的细胞频数显著降低（0.123±0.089％ vs.0.227±0.140％和0.462±0.145％，P＜0.05）。癌灶组织中亚群CD8+iNKT和(CD4-CD8-) DN iNKT细胞频数显著低于癌旁组织中两者的细胞频数（14.8±9.4％ vs.25.2±10.8％;24.4±14.0％ vs.41.3±12.6％，P＜0.05），而癌灶组织中亚群CD4+iNKT细胞频数则显著高于癌旁组织中的细胞频数（37.3±12.9％ vs.24.3±7.2％，P＜0.05）。相较肝血管瘤患者外周血，HBV相关HCC患者外周血中CD3+iNKT细胞频数显著降低（0.152±0.362％ vs.0.373±0.200％，P＜0.05）。HBV相关HCC与肝血管瘤患者外周血中iNKT亚群细胞分布则无显著差异。 3 Tim-3在HBV相关HCC癌灶、癌旁组织和肝血管瘤患者正常肝脏组织中iNKT及各亚群细胞上的表达水平。与正常肝脏组织和癌旁组织比较，Tim-3在癌灶组织中的CD3+iNKT细胞上表达显著增高（51.2±8.3％ vs.18.4±3.4％和24.1±4.5％，P＜0.05）;且Tim-3的表达主要在癌灶组织中的CD4+iNKT亚群细胞上显著增高（62.0±6.9％ vs.35.4±4.2％和36.8±6.5％，P＜0.05）。 结论: 1与正常肝脏组织及HBV相关HCC癌旁组织比较，Tim-3在HBV相关HCC癌灶组织中的CD3+T细胞及CD4+和CD8+T亚群细胞上富集。 2 HBV相关HCC患者外周血、癌灶及癌旁组织中CD3+iNKT细胞频数较对照组降低。值得注意的是亚群分布的差异:与癌旁组织比较，癌灶组织中CD4+iNKT细胞百分数增高，而CD8+iNKT及(CD4-CD8-) DN iNKT细胞百分数则下降。 3与正常肝脏组织及HBV相关HCC癌旁组织相比较，Tim-3在HBV相关HCC癌灶组织中的iNKT细胞上表达增高，且以Tim-3+CD4+iNKT细胞为主。因此Tim-3可能通过抑制iNKT细胞参与了HBV相关HCC的免疫调控。