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老鹰茶是樟科木姜子属毛豹皮樟(Litsea coreana L.)的叶,俗称老鹰茶,分布于贵州、四川、安徽等地,其嫩茎叶作饮料,是我国南方各民族民间长期饮用的一种植物代用茶。近年来药理学研究表明豹皮樟具有抗氧化、降糖、降脂、抗炎及免疫调节等功效,其作用机制也逐渐得到阐明。化学研究表明豹皮樟含有黄酮、皂苷、有机酸、香豆素和鞣质等成分,其中黄酮类成分含量高,且是其活性主要成分。我们曾经对豹皮樟的正丁醇部分进行化学成分研究,分离得到槲皮素、山柰酚、(+)-儿茶素、β-谷甾醇、胡萝卜苷、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、山柰酚-3-O-β-D-半乳糖苷、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷、等化合物。本文继续对老鹰茶正丁醇萃取部分的化学成分进行分离、纯化和结构鉴定;对分离得到的单体化合物进行初步的抗炎免疫活性筛选研究。1.老鹰茶正丁醇层的提取分离与结构鉴定老鹰茶10kg,以10倍量体积分数70%乙醇回流提取3次,时间分别为2、1、1h。过滤,合并滤液,减压回收乙醇,得到总浸膏。浸膏用水分散,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得正丁醇部分2kg。将该萃取物用D101大孔树脂柱粗分后,再用硅胶柱反复分离,硅胶柱用不同比例的石油醚-乙酸乙酯和氯仿-甲醇洗脱系统梯度洗脱,最后用Sephadex LH-20柱色谱和制备液相纯化,经重结晶得到20化合物。对所分离的20个单体成分,经理化反应和薄层层析鉴定、HPLC分析和紫外光谱、核磁共振氢谱、核磁共振碳谱和质谱解析,已鉴定出其中14种化合物的结构:邻苯二甲酸正丁酯、二氢黄酮-7-O-β-D-葡萄糖、山奈酚-3-O-(6’’-反式对羟基肉桂酰基)-β-D-甘露糖、山奈酚-3-O-(6’-反式对羟基肉桂基)-β-D-葡萄糖、反式对羟基肉桂酸、水杨酸、原儿茶酸、菜豆酸、Isoepiphyllocoumarin、Phyllocoumarin、Epiphyllocoumarin、Isophyllocoumarin、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖、5-(2-苯乙基)-3-羟基苯酚-β-D-葡萄糖,其中化合物iso-epiphyllocoumarin、 iso-phyllocoumarin、3,5-二羟基二苯乙烷-3-O-β-D-葡萄糖为新化合物,其它11种化合物均为从该种植物中首次发现。2.单体体外抗炎免疫活性筛选本实验旨在观察单体化合物结构与免疫调节活性之间的构效关系。选择健康♂SD大鼠,饲养10~15天,取大鼠的免疫细胞(腹腔巨噬细胞)体外给药培养并检测一些免疫指标:酶联免疫吸附法测定IL-1、PGE2和TNF-α分泌水平;对所选择的6种天然化合物的抗炎免疫活性作了初步的筛选。发现6种化合物均有免疫调节作用,其中Iso-epiphyllocoumarin、Phyllocoumarin、Epiphyllocoumarin、Iso-phyllocoumarin,5-(2-苯乙基)-3-羟基苯酚-β-D-葡萄糖五种化合物的抗炎免疫活性较强,山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖的活性较弱。同时Isoepiphyllocoumarin、Phyllocoumarin、Epiphyllocoumarin、Isophyllocoumarin四种同分异构体活性之间存在着差别,对IL-1和TNF-а的调节Isoepiphyllocoumarin和Isophyllocoumarin两种化合物活性强于Phyllocoumarin、Epiphyllocoumarin,但对PGE2的调节Phyllocoumarin、Epiphyllocoumarin两种化合物的活性强于Isoepiphyllocoumarin和Isophyllocoumarin两种化合物。