时间分辨荧光分析法（Time resolved fluoroimmunoassay，TRFIA）是近十年发展起来的非同位素免疫分析技术，是目前最灵敏的微量分析技术。它用镧系元素标记抗原或抗体，根据镧系元素配位化合物的发光特点，用时间分辨技术测量荧光，同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨，可有效地排除非特异荧光的干扰。由于具有灵敏度高、背景荧光干扰小等优点，在免疫分析技术、生化分析技术、液晶芯片技术、编码微球等方面有着广阔的应用前景。作为该技术的基础试剂，具有优良时间分辨荧光性质的稀土配位化合物设计与合成是该领域的一个重要课题。其中，铕配位化合物与其它稀土配位化合物相比，具有衰变时间长，斯托克斯位移大和发射带窄等特点，从而成为该领域的研究热点。本文设计合成了三种具有不同刚性配体的铕配位化合物，并对其结构与荧光特性进行了分析研究。在此基础上，将三种铕配位化合物分别溶胀到聚苯乙烯微球中，制备了时间分辨荧光微球，并对其荧光性能进行了表征和分析。本论文具体工作如下:　　1)设计合成了一种新型柔性芳香二齿配体。以乙酰丙酮、甲基丙烯酸甲酯和碳酸钾为原料，通过迈克尔加成反应合成了产物A(4-乙酰基-5-羰基己酸甲酯)。再以乙酰乙酸叔丁酯、亚硝酸钠为原料合成了产物B（2-羟基亚氨基乙酰乙酸叔丁酯）。然后以A、B为原料，通过系列反应合成了联吡咯衍生物C（5-叔丁氧羰基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-丙酸甲酯）。最后以C、醋酸铅为原料，合成了目标产物D(2，2-亚甲基双[5-叔丁氧羰基-4-甲基-1H-吡咯-3-丙酸甲酯](PYDE))。并对其中的部分合成条件进行了优化。　　2)合成了三种具有不同刚性配体的铕配位化合物。以六水合氯化铕EuCl3 H2O、三正辛基氧磷(TPO)、邻菲罗啉(PTM)、PYDE和1-(2-萘甲酰)-3，3，3-三氟丙酮(NTA）为原料，合成了三种铕配位化合物Eu(NTA)3(TPO)2、Eu(NTA)3(PTM)和Eu(NTA)3(PYDE)。通过核磁对其结构进行了表征。并研究了配体结构对其荧光特性的影响。在此基础上，研究了不同溶剂对其荧光性能的影响。实验结果表明，随着配体刚性的增强，三种铕配位化合物的荧光发射峰波长发生红移，即向短波长方向移动;随着溶剂极性的增大，Eu(NTA)3(TPO)2、Eu(NTA)3(PTM)、Eu(NTA)3(PYDE)分子的荧光发射峰波长都发生红移，即向长波长方向移动，呈现正溶剂化效应。　　3)合成了三种铕-聚苯乙烯微球。以苯乙烯、甲基丙烯酸和为原料，过硫酸钾为引发剂，采用乳液聚合合成了聚苯乙烯微球（直径200nm左右）。然后通过溶胀法将三种铕配位化合物包埋到微球中，制备了时间分辨荧光微球，并通过SEM和荧光分光光度计对其形貌与性能进行了表征。在此基础上，选取三种不同极性的溶剂，研究了溶胀溶剂对微球荧光性能的影响;重点研究了微球表面基团对其荧光性质的影响。实验结果表明，二氯甲烷作为溶胀剂对聚苯乙烯微球溶胀效果最好，微球表面羧基化会使其荧光发射波长红移。