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目前在畜禽养殖业中抗生素滥用已经成为一大安全隐患,为寻找其有效替代物,肠道益生菌的开发和应用一直是研究热点。此外,近几年源于肠道内的一些正常微生物菌群也为开发新型微生态制剂开辟了新的方向,研究发现在动物肠道微生态系统中,厌氧菌占99%以上。我们着力于从鸡肠道原著厌氧菌群中开发一种益生功能显著、耐受能力强且易于扩大培养的微生态制剂。本试验第一部分为鸡肠道内部分微生物的体外分离培养,首先采用传统细菌分离培养的方法结合体外静置厌氧培养,从鸡的盲肠中分离得到两株梭菌属细菌C1和B5,通过分子鉴定发现两者都是报道很少的新型梭菌菌株,利用DAPI染色和革兰氏染色确定其形态特异且两株菌差别很大,生理生化指标检测结果虽然显示两株菌均具有梭菌属细菌所特有生理生化特性,但具体分类还需进一步研究,体外试验发现C1对沙门氏菌没有明显抑制作用;其次利用体外厌氧连续发酵模型对成年鸡的盲肠内容物进行连续发酵培养,采用PCR-DGGE技术对每天的发酵产物进行检测,发现所得产物中的菌群结构保持基本稳定,说明能够在体外连续获得成熟稳定的鸡肠道菌群。本试验第二部分研究了体外培养的肠道微生物对鸡健康状况的影响,分别用一株乳酸菌、梭菌C1、鸡盲肠内容物发酵产物和四环素对新生小鸡的肠道菌群进行干扰,阳性对照组小鸡则正常生长,5天后对所有小鸡攻击沙门氏菌,每周称取体重并解剖取盲肠内容物进行检测。体重结果显示四环素组与梭菌组之间差异不明显,但平均体重均显著高于阳性对照组(P<0.05);沙门氏菌活菌数检测结果发现乳酸菌组、梭菌组、发酵组和四环素组较阳性对照组差异显著(P<0.05);运用PCR-DGGE技术对菌群结构检测的结果显示发酵组对小鸡菌群结构影响较大;通过Q-PCR方法对肠道内的不同细菌进行定量分析结果显示每组鸡肠道内主要菌群的含量差异不明显。可以得出如下结论:这株乳酸菌在体内具有抑制沙门氏菌的作用,但对小鸡生长作用不明显;梭菌C1虽然在体外对沙门氏菌的生长没有抑制作用,但动物保护实验显示梭菌C1不仅能抑制沙门氏菌在小鸡肠道中的定植,而且其增重效果与四环素效果接近,说明其对鸡的促生长作用明显;成熟鸡的肠道菌群能加快小鸡的肠道菌群发育,对沙门氏菌也有一定的抑制作用,但对小鸡的增重效果不明显。