宫颈癌是妇女好发的恶性肿瘤，其发生率位于女性生殖系统常发恶性肿瘤的第二位，人乳头状瘤病毒(HPV)感染已明确为宫颈癌的重要致病因素，但许多HPV阳性的妇女并不发生宫颈癌，故认为还有别的病因参与宫颈癌的发生。现有许多研究认为多种抑癌基因的失活、癌基因的激活是宫颈癌发生的重要原因。脆性组氨酸三联基因(Fragile Histidine Triad gene，FHIT)作为与多种实体瘤发生密切相关的基因，已发现其在宫颈癌的发生发展中起重要的作用。FHIT基因在人体许多正常组织如脾、前列腺、卵巢、小肠、肺，宫颈等都有正常表达。而在许多实体瘤中FHIT基因结构发生畸变，FHIT基因表达的蛋白有明显降低或缺失，但现在对FHIT基因失活机制还不甚清楚，因为其基因突变形式有杂合性缺失、纯合性缺失及额外碱基序列插入，而点突变较少。检测的某些FHIT基因处纯合性缺失仅影响了FHIT的内含子，反而使外显子排列更加紧密，还有人认为FHIT等位基因中的一条发生杂合性缺失，而另一条正常，不影响基因的转录。最新的研究发现基因启动子区的甲基化可以通过多种方式抑制基因的转录，从而导致抑癌基因的失活，如在某些肿瘤的发生中，RARβ、P16、DAPK、GSTP1、CDH13、RASSFIA等基因失活与基因高甲基化有关。FHIT基因5′端CpG岛的甲基化在前列腺癌、乳腺癌、食管癌、肺癌中也已被检测出来。但关于FHIT基因5′端CpG岛高甲基化与基因失活在宫颈郑州大学2003年硕士研究生毕业论文宫颈癌组织中FHIT墓因5’端c娜岛甲墓化及其与荃因失活的关系研究癌发生中的作用，国内外很少有报道。因此本研究检测了宫颈癌组织FHIT基因5’端CpG岛甲基化和FHrr蛋白表达状况，以探讨FHrr基因5’端CpG岛甲基化的发生状况与基因失活的关系及其在宫颈癌发生发展中的作用。 材料与方法 收集2001一2002年郑州大学第一附属医院妇产科和河南省肿瘤医院妇瘤科 手术切除或门诊活检的宫颈癌新鲜标本40例，所有标本均经病理学明确诊 断。患者年龄26一68岁，平均年龄46岁。按1995年FIGO分期:I期14例，11 期23例，nl期1例，IV期2例。组织学类型均为宫颈鳞状上皮细胞癌，组织 学分级:高分化4例，中分化19例，低分化17例。所有标本切下后分为两份，一份作PCR，一份作免疫组织化学染色。另选10例因子宫肌瘤而切除子 宫的正常宫颈鳞状上皮作为对照。 本研究运用甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)和免疫组织化学法检测了正常宫颈鳞状上皮、宫颈癌组织中FHrr基因的5’端CPG岛的甲基化发生状况和FHrr蛋白表达情况，并将它们与临床病理资料相结合进行分析。 采用SPSSn.0统计软件包进行统计分析，以尸<0.05为有统计学意义。 结果 1.40%(16/40)的宫颈癌、既(o/10)的正常宫颈存在FHxT基因5’端epo岛的甲基化，两组甲基化发生率的差异具有显著性， P<0.05; 2.宫颈癌临床I期、H期、IH一IV期的甲基化率分别是14.28%、56.52%、33.33%。I、H期之间甲基化率的差别具有显著性，P<0.05;而工期或H期与I工工一IV期间甲基化率差异无显著性，P>O.05; 3.用未甲基化的引物进行扩增，在10例正常宫颈和36例宫颈癌组织中检测有FHrr基因5’端cpG岛的未甲基化存在，二者间未甲基化的阳性率在统计学上差异无显著性，办0.05;16例存在甲基化状态的宫颈癌中有4例用未甲基化的引物未扩出阳性产物; 4.宫颈癌组织中FHIT基因的甲基化率随组织学分级的增高而增高，但在统计学上差异无显著性，P>0.05; 5.70%(28/40)的宫颈癌组织中有明显的F班T蛋白表达降低或缺失，10例正常宫颈组织中FHrr蛋白表达正常。15/16例有FHIT基因5’端cpG岛甲郑州大学2003年硕士研究生毕业论文宫颈癌组织中FHIT基因5’端cPG岛甲墓化及其与基因失活的关系研究 基化的宫颈癌标本中有异常的FHrr蛋白表达，还有12例无FHIT基因5’端 CpG岛甲基化的宫颈癌标本中有异常的FHIT蛋白表达，其中2例缺乏FHIT 蛋白表达;甲基化阳性、甲基化阴性的宫颈癌标本中FHIT蛋白表达降低或缺 失率分别为93.75%、50%，差异具有显著性，P<0 .05。 6.4例宫颈癌患者的淋巴结有肿瘤转移，3例有FHIT基因5’端CpG岛的 甲基化和异常的FHIT蛋白表达。统计学上，FHIT基因甲基化率及FHIT蛋白 异常表达率在肿瘤淋巴结是否转移的标本之间，差异无显著性。 结论 1.正常宫颈鳞状上皮组织中不存在FHrr基因甲基化的状态;在宫颈癌组 织中，FHrr基因5’端cpG岛的甲基化率较高，且随临床分期的增高而增高， 这提示FHrr基因5’端cpG岛的甲基化可能在宫颈癌的发生发展中起重要的作 用。 2. FHIT基因5’端cpG岛的甲基化发生率随宫颈癌的组织学分级的增高 而增高，而统计学上差异无显著性，这可能与我们选择的标本的例数较少有 关。 3.宫颈癌组织中有显著的FHrr蛋白表达降低或缺失，15/16例有基因甲基化的癌标本中有异常FHrr蛋白表达。然而，12例无基因甲基化的癌标本也有FHIT蛋白的异常表达，提示基因甲基化可以导致基因的失活，但不是基因 失