新型蛋白质色谱介质的研究

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本文主要研究新型蛋白质色谱介质的研制及其表征。在第一章文献综述的基础上,本文分别对以有机合成高分子聚合物为基质的大孔介质的研制与表征,以琼脂糖为基质的大孔介质的研制与表征和高密度薄层(琼脂糖包裹玻璃珠)介质的研制与表征进行了深入的研究。此外,本文利用模拟实际物系考察大孔琼脂糖介质纯化蛋白质的性能,并考察了高密度介质膨胀床流体力学和粒径分布。本文通过自由基悬浮聚合反应制备了有机合成高分子类大孔介质。采用液体致孔方式,利用两种不同性质的液体致孔剂(甲苯和正庚烷、环己醇和十二烷醇)混合致孔。通过实验获得制备大孔介质的优化配比,不同比例的混合致孔剂对大孔介质的性能有影响,大孔的存在有利于提高介质吸附容量和传质速率。通过油水两相乳化法,采取一种固体颗粒——碳酸钙微粒为致孔剂成功地制备大孔琼脂糖介质,经二乙胺基乙基修饰,获得大孔阴离子交换介质。由于大孔的存在,此类介质在吸附容量和传质方面有较大的提高,同时还保留琼脂糖类介质的特点,在蛋白质纯化应用中表现出较佳的性能。通过油水两相乳化法,利用琼脂糖包裹玻璃珠制备高密度薄层介质,应用于膨胀床吸附分离过程。采用两种不同粒径的玻璃珠可以制备出两种不同粒径和密度分布的高密度薄层介质。由于壳核结构的存在,高密度薄层介质的表观扩散系数比相应的均相介质提高一倍多。本文还考察了高密度介质膨胀床流体力学和粒径分布,发现高密度介质的粒径和密度同时沿床层轴向方向上呈现有序分布。以介质的密度和粒径作为床层高度的变量得到一个经验关联式,可以作为描述介质在膨胀床内分布的一般经验关联式。
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