桔小实蝇对常用杀虫剂的敏感性及其3种解毒酶酶学特性研究

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本学位论文以桔小实蝇Bactrocera dorsalis为研究对象,采用局部点滴法测定了桔小实蝇不同地理种群对有机磷类杀虫剂(辛硫磷、三唑磷、毒死蜱和马拉硫磷)、拟除虫菊酯类杀虫剂(高效氯氰菊酯和溴氰菊酯)、苯基吡唑类杀虫剂(氟虫腈)、生物源类杀虫剂(阿维菌素)和烟碱类杀虫剂(毗虫啉)等9种杀虫剂的敏感性;在此基础上,选用3种增效剂磷酸三苯酯(TPP)、顺丁烯二酸二乙酯(DEM)和胡椒基丁醚(PBO),研究了它们对不同杀虫剂的增效效果;为阐明桔小实蝇对高效氯氰菊酯产生抗性的潜在机理,本研究在增效实验的基础上研究了增效剂对桔小实蝇3种解毒代谢酶活性的影响。研究工作得到了国家973计划前期研究专项(2009CB125903)和重庆市杰出青年科学基金项目(CSTC2009BA1042)的资助,经过2年多的研究,获得以下主要结果:1.桔小实蝇不同地理种群对9种杀虫剂的敏感性测定采用局部点滴法测定了桔小实蝇东莞(DG)、广州(GZ)、海口(HK)和昆明(KM)4个种群对有机磷类、拟除虫菊酯类、苯基吡唑类、生物源类和烟碱类9种杀虫剂的敏感性。生物测定结果表明:桔小实蝇同一地理种群对不同药剂的敏感性存在差异;桔小实蝇不同地理种群对同一种杀虫剂的敏感性亦存在差异。其中,氟虫腈对桔小实蝇4个种群的毒杀作用效果最好,而马拉硫磷和吡虫啉均较差。桔小实蝇对其他杀虫剂的敏感性在4个种群中的效果分别为:昆明种群,由强到弱依次为辛硫磷、阿维菌素、三唑磷、高效氯氰菊酯、毒死蜱、溴氰菊酯;海口种群,由强到弱依次为溴氰菊酯、三唑磷、阿维菌素、辛硫磷、毒死蜱、高效氯氰菊酯;东莞种群,由强到弱依次为三唑磷、辛硫磷、毒死蜱、阿维菌素、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯;广州种群,由强到弱依次为辛硫磷、三唑磷、毒死蜱、阿维菌素、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯。2.增效剂对9种杀虫剂的增效作用研究通过增效实验发现:就同一种增效剂而言,其对相同的杀虫剂的增效效果在不同种群间存在差异;相同地理种群中,同一种增效剂对不同的杀虫剂亦表现出不同的增效效果。对有机磷类杀虫剂来说,PBO、TPP和DEM可以明显增强马拉硫磷对桔小实蝇东莞种群、三唑磷对桔小实蝇昆明种群的毒杀作用,PBO和TPP对毒死蜱在昆明种群中表现出较好的增效作用,TPP在广州种群中对三唑磷的增效作用较好,而3种增效剂对辛硫磷的作用效果普遍较差,甚至表现出负增效效果。对拟除虫菊酯类杀虫剂来说,在昆明种群中,3种增效剂对高效氯氰菊酯的增效作用较好,但对溴氰菊酯的增效作用较差;在东莞种群中,3种增效剂无论是对高效氯氰菊酯还是溴氰菊酯均表现出较好的增效作用;在海口种群中,除PBO和DEM对高效氯氰菊酯的增效作用较好外,其它增效剂对高效氯氰菊酯和溴氰菊酯的增效效果均较差;在广州种群中,3种增效剂对两种杀虫剂的增效作用均较好,且对溴氰菊酯的增效作用效果优于对高效氯氰菊酯的效果。从3种增效剂对生物源类杀虫剂阿维菌素的增效效果可以看出,在桔小实蝇昆明和东莞种群中,3种增效剂的增效效果均为PBO最好、TPP次之,DEM较差;而在桔小实蝇海口和广州种群中,3种增效剂的增效作用均为DEM最好、PBO次之,TPP最差。但3种增效剂对苯基吡唑类杀虫剂氟虫腈和烟碱类杀虫剂吡虫啉的增效作用不明显。3.增效剂对桔小实蝇解毒代谢酶活性的影响经不同浓度药剂处理后,桔小实蝇体内谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)、羧酸酯酶(CarEs)和细胞色素P450(P450)活性在24h内均呈现出动态的变化过程,这可能是桔小实蝇为适应外部的刺激而产生的一种自然反应过程。研究发现:不同增效剂对3种解毒代谢酶的抑制情况不尽相同,TPP抑制了CarEs的活性。单个组织中酶的活性明显高于整头虫,GSTs、P450和CarEs的活性在脂肪体、马氏管和中肠存在差异,CarEs活性在脂肪体最高,GSTs活性在中肠最高,P450活性在马氏管最高;GSTs和P450两种酶的活性被相对应的增效剂抑制;不同增效剂对不同组织中3种解毒代谢酶的抑制情况也不相同,表明桔小实蝇在对高效氯氰菊酯的解毒代谢过程中不同组织的功能不同。同时,研究表明3种解毒代谢酶均参与了桔小实蝇对高效氯氰菊酯的代谢,其中CarEs的作用效果尤为突出。
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