论文部分内容阅读
体外流体动力学模型是在体外通过模拟体内环境,观察细胞在流体状态下的功能改变。Venaflux是爱尔兰Cellix公司最新研发生产的用于观察细胞与细胞、细胞与配体之间的在流体状态下互相作用的新型体外流体动力学平台。目前仪器提供了6种不同的芯片满足各种实验条件的需要。VenaFlux平台着很多独特的优势:液体在流动过程中非常精确而且稳定;实验所需的样品量非常小,只需要几微升到十几微升;可以同时进行多个样本的实验。自从它问世以来,受到许多科研机构和制药公司的青睐。我们实验室在国内率先引进这台仪器,经过摸索和使用,现已初步建立了仪器的使用平台,并验证了可溶性表氧化物酶抑制剂可以在流体条件下抑制内皮细胞与单核细胞的黏附。 单核细胞与内皮细胞黏附是动脉粥样硬化早期的病理改变,也是许多抗动脉粥样硬化药物治疗的靶点。芥子酸衍生物(Sinapic acid,SA1～SA10)是一类在天然草本和高纤麦麸谷物等提炼出来的苯丙类的复合物,它有着中等强度的抗炎抗氧化活性。前期研究结果表明,SA可以通过抗炎抗氧化作用而抑制内皮细胞激活,具有预防和治疗动脉粥样硬化的潜质。我们发现SA6可以在mRNA水平上抑制内皮细胞中MCP-1、IL-1β、TM、E-selectin等表达。利用VenaFlux平台,SA6可以抑制由TNF-α诱导的内皮细胞与THP-1细胞之间的黏附。单核细胞的激活在细胞间黏附的过程中同样是重要的致病因素,激活后的单核细胞持续释放促炎物质加速病情的进展。我们发现SA6可以在mRNA水平上抑制THP-1细胞中MCP-1、IL-1β、IL-8、MMP-9等促炎因子的表达,并且可以抑制THP-1细胞与VCAM-1的黏附。由于VLA-4是单核细胞表面VCAM-1的特异性配体,我们进一步发现SA6可以抑制了VLA-4的激活而对正常细胞表面的VLA-4没有影响。通过解离实验表明,SA6可以促进部分激活后的VLA-4与VCAM-1解离,对未激活的VLA-4并无明显作用,这与之前的结果相一致,表明SA6可以部分通过改变VLA-4激活后分子的结构而发挥抗动脉粥样硬化的作用。同时,SA6可以抑制内皮细胞和单核细胞中TF的表达,可能具有抗血栓形成的潜力。 综上所述,利用VenaFlux平台对SA6在动脉粥样硬化早期病理改变中的研究,揭示了芥子酸衍生物新的抗炎机制:SA6不仅可以抑制内皮细胞和单核细胞激活,还可以减少细胞间黏附,抑制VLA-4激活,促进黏附细胞解离进而在动脉粥样硬化疾病过程中发挥保护作用。