灵芝孢子粉对犬皮肤创伤愈合研究

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犬皮肤创伤是一种常见的外科疾病,兽医临床上主要采取的常规治疗手段是器械缝合搭配药物治疗。灵芝孢子粉作为近些年热门研究的中药材,其主要应用于日常保健提高免疫力和抗肿瘤,基于目前研究已知其具有调节免疫和抗氧化的药理作用为基础,首次将其应用于犬皮肤创伤治疗当中。本课题旨在验证灵芝孢子粉治疗皮肤创伤可行性,并探究其作用机制。本试验首先采用10只中华田园犬对其进行创伤处理,随机分为两组,试验组饲喂促创愈合处方粮,对照组饲喂普通日粮,进行组内稳定性和组间差异性的对比,验证创伤模型的可用性。课题采用12只中华田园犬,外科手术用打孔器在犬背侧制造5个直径15mm的圆形创面,将创伤犬随机分为2组(n=6),试验组日常饲粮中加入破壁灵芝孢子粉(3.76 g/kg),对照组不加灵芝孢子粉,两组正常饲喂。在0d、3d、7d、14d和21d时,拍照记录创面,观察创面情况并计算各时期创面愈合率,记录评价犬的精神状况和创伤愈合时间。在第7d、14d和21d时,通过外科手术采集皮肤创面组织。皮肤创面制作切片分别进行HE染色与MASSON染色,观察炎性细胞和胶原沉积情况,并记录微血管生成和衰退情况;检测皮肤创面组织丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平;检测皮肤创面组织前列腺素E2(PGE2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素1α(IL-1α)水平;检测皮肤创面Ig A、Ig M和Ig G水平;使用Realtime PCR的方法检测血小板衍生因子(PDGF)、碱性细胞生长因子(b FGF)和血管内皮生长因子(VEGF)基因相对表达量。创伤模型验证结果:各组内各创面间愈合无显著差异(P>0.05),试验组需20.32±0.31d愈合,显著低于对照组23.56±1.05d愈合(P<0.05),证明创伤模型具有良好的组内稳定性和组间差异性;检测灵芝孢子粉治疗效果试验结果:在3d、7d、14d和21d时试验组创面平均愈合率均高于对照组,3d时呈显著差异(P<0.05),试验组需22.14±1.65d愈合,显著低于对照组25.06±1.35d(P<0.05),3d和7d时试验组整体状态优于对照组。切片观察显示,试验组炎性细胞消退和胶原纤维沉积速率均优于对照组。检测MDA与SOD结果显示,21d时试验组SOD水平显著高于对照组(P<0.05)。检测PGE2、TNF-α和IL-1α结果显示,7d时试验组IL-1α水平显著高于对照组(P<0.05),14d时试验组PGE2水平显著高于对照组(P<0.05)。检测Ig A、Ig M和Ig G结果显示,7d时试验组Ig G水平极显著高于对照组(P<0.01),14d时试验组Ig M水平极显著高于对照组(P<0.01)。Real-time PCR检测PDGF、b FGF和VEGF基因相对表达量结果显示,7d时试验组PDGF、b FGF和VEGF基因相对表达量均极显著高于对照组(P<0.01),14d时试验组VEGF基因相对表达量极显著高于对照组(P<0.01)。试验结果表明,灵芝孢子粉可通过提高组织抗氧化活性、炎性因子和免疫球蛋白水平,增加生长因子基因表达量。一系列综合作用,对犬皮肤创伤起到治疗效果,缩短创伤愈合时间。
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