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甘露聚糖结合凝集素(mannan-binding lectin，MBL)是C型凝集素超级家族胶凝素家族中一种重要的天然免疫防御分子，可识别结合各种病原体表面的糖分子，并通过激活补体凝集素途径而破坏病原体，或通过与吞噬细胞表面胶凝素受体结合介导直接调理作用。然而，MBL功能的发挥有赖于其一定的血清浓度，MBL缺乏或血清浓度过低是引起调理吞噬缺损的根本原因，可增加机体对各种病原微生物的易感性而导致机体反复感染，并且与自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮(systemic lupuserythematosus，SLE)、类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)的发生、发展有关。 现已证实，MBL血清浓度低下主要与其结构基因第一外显子的B、C和D等位基因变异体(分别编码54、57和52位氨基酸)有关，而正常的MBL等位基因为A。每一种变异体均由单碱基突变引起，致使MBL分子的胶原样区发生改变，导致突变个体血清MBL水平低下，有可能突变MBL分子的功能也受损。突变等位基因频率在不同种族人群差异很大，但总体上高的令人惊奇，可达0.29。亚洲人MBL血清浓度低下主要由54位密码突变引起。 我国是一个多民族人口大国，有必要对各民族人群MBL结构基因的突变情况进行调查，以便为我国MBL缺损的防治(研究)提供决策依据。鉴于此，我们对汉族、维吾尔族人群MBL基因第54位点突变的情况进行了研究。 目的： 1．建立敏感性高、特异性强、简单快捷、适合我国国情(条件较差)的MBL基因点突变和SNP的检测技术。 2．利用该技术对汉族、维吾尔族人群MBL结构基因第一外显子GGC54GAC突变进行检测，并估算其基因频率，比较汉族、维吾尔族该位点突变的差异。 材料与方法： 1．收集汉族、维吾尔族普通人群血标本，提取白细胞基因组DNA， 并建立扩增目的基因片段的基本PCR反应体系。 2．建立聚合酶链反应－单链构象多态性分析＊ingle strand conforma－ tlonpolymorphlsm analysis ofpol仰erase chain reaction production， PCR－SSCP）方法，初步调查汉族人群MBL基因GGC54GAC突变情况。 3．建立分子灯塔（molecular beacon，MB）技术，检测分析汉族。 维吾尔族人群MBL基因GGC54GAC突变基因。 结果： 1．用红细胞裂解液和 PCR缓冲液／非离于去污剂／蛋白酶K两种自配 试剂成功地提取了所收标本的人白细胞基因组DNA，并以此为模板成功 扩增出预期的 109hp MBL目的基因片段。 2．PCR－SSCP 方法初步筛查166 个汉族样本，共检出MBL GGC54GAC杂合突变19例，占11．45O，未检出突变纯合子。 3．成功建立了 MB杂交可视检测技术，并在 13 8份汉族样本中检出 MBL GGC54GAC突变纯合子 3例，占 2．17％，杂合子 29例，占 ZI刀1％； 120份维吾尔族标本中，检出突变纯合子1例，占0．83％，杂合子22例， 占 18．34％。 结论： 1．MB杂交技术特异性强，简单快捷，能进行可视性检测，完全适 用于点突变和 SNP的研究，技术特点明显优于PCR－SSCP。 2．汉族人群MBL结构基因第一外显子GGC54GAC 突变频率为 0月3，维吾尔族的突变频率为0．10，两民族GGC54GAC基因型分布和突 变频率无显著差异。