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背景和目的子宫内膜癌是发生于子宫内膜的一组上皮性恶性肿瘤,是女性生殖道三大恶性肿瘤之一,以来源于子宫内膜腺体的腺癌最常见,近些年来其发病率在世界范围内不断呈上升趋势。IGFBPs是IGFs(Insulin-like growth factor system,IGFs)体系中重要成员,而胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白(Insulin like growth factor binding protein-related protein1,IGFBP-r P1)因其与胰岛素的强结合能力而受到广泛关注。课题组前期研究表明:IGFBP-r P1与胰岛素抵抗有关,参与了子宫内膜腺癌的发生发展,但其表达调控机制不明。DNA甲基化是现研究基因表达调控的热点,在结肠癌、胃癌、乳腺癌、贲门癌中研究发现IGFBP-r P1基因的异常甲基化状态与其表达调控有关。本研究应用甲基化特异性聚合酶链式反应检测IGFBP-r P1基因Cp G岛的甲基化状态,采用实时荧光定量-聚合酶链反应和免疫组化SP法分别检测IGFBP-r P1基因m RNA和蛋白的表达,探究IGFBP-r P1基因甲基化状态与其m RNA和蛋白表达的关系,进一步阐明子宫内膜腺癌发生的分子生物学机制。方法1.实验组织标本分为三组:子宫内膜腺癌组45例、子宫内膜不典型增生组30例、子宫内膜单纯性增生组30例。2.甲基化特异性聚合酶链式反应:检测各组IGFBP-r P1基因启动子区和第一外显子区Cp G岛的甲基化状态。3.实时荧光定量聚合酶链反应:检测各组IGFBP-r P1基因m RNA的表达。4.免疫组化SP法:检测各组IGFBP-r P1基因蛋白的表达。5.统计学方法:采用SPSS 17.0软件进行数据的统计分析,定性资料各组间的两两比较采用χ2检验,用Bonferroni法校正检验水平。定量资料结果以sx±表示,经过正态性和方差齐性检验后行方差分析,两两比较采用LSD-t检验,两变量的相关性用Spearman相关分析。结果1.IGFBP-r P1基因在子宫内膜腺癌组织中启动子区的甲基化率(15/45)高于其在第一外显子区的甲基化率(5/45)(χ2=6.429,P<0.05)。2.IGFBP-r P1基因在子宫内膜腺癌组织中启动子区的甲基化水平明显低于子宫内膜非典型增生组织(20/30)(χ2=8.036,P<0.05)和单纯性增生组织中的甲基化率(21/30)(χ2=9.696,P<0.05)。3.IGFBP-r P1基因在子宫内膜腺癌组织中m RNA和蛋白的表达量明显高于子宫内膜单纯性增生组织和子宫内膜不典型增生组织(P<0.05),且与甲基化的程度呈负相关(r=-0.287,P<0.05)。结论1.IGFBP-r P1基因在子宫内膜腺癌组织中甲基化状态主要发生启动子区,且呈低甲基化状态。2.IGFBP-r P1基因在子宫内膜腺癌组织中呈高表达状态,且与其甲基化状程度成负相关,提示IGFBP-r P1启动子区的低甲基化状态是其在子宫内膜腺癌中高表达的调控机制之一。