SDF-1对糖尿病大鼠溃疡创面愈合的研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:snoopyfeile123
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[目的]建立一种尽可能模拟糖尿病皮肤溃疡发生机制的糖尿病动物溃疡模型。[方法]采用高糖高脂饲料喂养联合小剂量STZ腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,对糖尿病大鼠造模前后进行大体形态观察,比较造模前后血糖和体重的变化。然后在实验性糖尿病大鼠背部制作方形(2cm×2cm)溃疡创面,对溃疡创面进行大体形态学观察,HE染色观察溃疡创面组织病理学变化。组间两两比较采用t检验。显著性检验标准设定为P<0.05,数据差异有统计学意义。[结果](1)糖尿病大鼠模型成立后大体形态观察,可见明显多尿、多饮及体重减轻症状;(2)将糖尿病造模前后的体重、血糖进行比较,造模后体重(288.5862±62.29687)较造模前(302.8815±65.06324)有所下降(p<0.05);造模后血糖(24.9785±3.95085)较造模前血糖(5.5400±0.79310)明显上升(p<0.05)。(3)大鼠皮肤创面大体形态及组织形态观察均呈现溃疡样改变;[结论]通过本研究建立了较为理想且稳定的糖尿病溃疡动物模型。[目的]获得外源性基质细胞延生因子(SDF-l)治疗糖尿病大鼠皮肤溃疡合的最佳浓度。[方法]采用SD雄性大鼠,按照第一部分的方法建立糖尿病大鼠溃疡模型,随机分成对照组8只、SDF-1干预组24只(分为高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组各8只)。各组溃疡创面分别予0.9%生理盐水、50ug/kg、25ug/kg和12.5ug/kg SDF-1干预。透明膜描记创伤后第3天、7天、14天、21天创面面积计算创面愈合率;肉眼观察肉芽组织生长及炎症情况;电子显微镜观察第21天创面成纤维细胞数量及毛细血管生成情况;酶联免疫法检测创面组织中成纤维细胞生长因子(FGF)、羟脯氨酸(HYP)、血管内皮生长因子(VEGF)及基质细胞衍生因子-1(SDF-1)的表达水平。多组间比较采用方差分析,两组间比较采用LSD-t法。显著性检验标准设定为P<0.05,数据差异有统计学意义。[结果](1)溃疡创面肉眼观察示中剂量组的肉芽组织生成情况较其它三组最佳,周边炎症反应轻。(2)HE染色电镜下观察四组大鼠溃疡创面组织均可见成纤维细胞、毛细血管生成,并伴有炎症细胞浸润。但中剂量组的成纤维细胞和毛细血管数量及形态均好于其它三组。(3)四个组创面愈合率(%)比较,中剂量组创面愈合率优于对照组和低剂量组,不同时间点分别为[46.43±18.14,67.01±15.14,80.40±4.37,86.96±2.62]vs[(29.73±8.88,42.95±8.51,69.95±4.99,78.43±6.26);(22.78±16.00,57.46±10.84,68.28±10.06,77.29±11.17),P 值均<0.05];其余各组间比较均无统计学意义(P值>0.05)。(4)四个组FGF(ng/L)比较,中剂量组优于对照组、高剂量组和低剂量组,不同时间点分别为[8.10±1.17,13.98±4.35,15.42±1.68,18.31±0.70]vs[(11.25±1.96,12.87±1.53,12.23±2.83,10.72±2.93);(9.90±2.69,9.52±1.13,12.20±2.13,14.06±3.12);(9.23±0.55,11.24±2.82,11.22±3.04,12.55±2.10),P 值均<0.05];其余各组间比较均无统计学意义(P值>0.05)。(5)四个组HYP(ug/L)比较,中剂量组优于对照组、高剂量组和低剂量组,不同时间点分别为[257.26±33.20,280.55±45.90,342.89±38.96,403.63±40.00]vs[(236.96±52.42,244.35±93.03,313.54±71.70,308.80±80.21);(210.97±28.38,208.74±33.59,218.27±36.32,209.00±45.00);(222.20±79.38,253.58±70.35,289.84±99.20,276.56±78.03),P 值均<0.05];其中对照组>高剂量组、低剂量组>高剂量组(P值均<0.05)。对照组和低剂量组相比,差异无统计学意义(P值>0.05)。(6)四个组VEGF(ng/L)比较,中剂量组优于对照组、高剂量组和低剂量组,不同时间点分别为[76.84±12.86,48.01±12.70,101.95士8.81,121.53±15.11]vs[(53.59±21.20,61.41±16.05,73.98±11.15,115.95±41.37);(73.97±7.09,71.52±9.88,73.19±7.22,86.03±10.75);(63.39±15.73,68.03±25.81,70.06±7.29,64.62±17.96),P值均<0.05];其中,对照组>低剂量组、高剂量组>低剂量组(P值均<0.05);对照组和高剂量组相比,差异无统计学意义(P值>0.05)。(7)予SDF-1干预后四个组SDF-1(pg/ml)表达水平的比较,不同时间点中剂量组[271.40±112.72,389.80±174.63,352.47±41.00,394.28±34.63]与对照组[262.12±38.150,205.82±83.65,190.44±54.82,397.05±95.57]表达水平相当(P值<0.05),其余各组间比较均无统计学意义(P值>0.05)。(8)细胞因子表达水平变化率的比较:FGF(ng/L):与对照组相比,中剂量组>高剂量组>低剂量组(P值<0.05);与中剂量组相比,高剂量组>低剂量组>对照组(P值<0.05)。HYP(ug/L):中剂量组>高剂量组(P值<0.05),其余各组间比较均无统计学意义。VEGF(ng/L):对照组>低剂量组(P值<0.05),中剂量组>低剂量组(P值<0.05),其余各组间比较均无统计学意义。SDF-1(pg/ml):各组间S DF-1的变化率均无统计学意义(P值>0.05)。[结论]适宜浓度(25ug/kg)的SDF-1对于糖尿病溃疡创面的愈合有显著的促进作用,为改善糖尿病溃疡等组织损伤的愈合速率和提高愈合质量提供了新的治疗手段。
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