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目的:探讨长期肠道菌群失衡与免疫功能的关系,为指导机体免疫功能低下患者免疫功能恢复的治疗提供“菌群调整”新策略。方法:1.实验分组:清洁级别Balb/c雌鼠(125只),给予基础饲料适应性喂养一周后,随机分为4组,低剂量抗生素灌服组(33只)、中剂量抗生素灌服组(34只)、高剂量抗生素灌服组(32只)和正常对照组(26只);2.实验周期:实验周期为150天,分别于8天、30天、60天、90天、120天、150天处死小鼠,收集样本进行指标检测;3.菌群失衡模型的建立:低剂量抗生素灌服组(L)、中剂量抗生素灌服组(M)、高剂量抗生素灌服组(H)小鼠分别用100mg/ml、200mg/ml、400mg/ml头孢曲松钠灌服,灌服剂量为0.2ml/次/只,一日2次,间隔6-8小时,直至实验结束,正常对照组用生理盐水灌服,剂量方法同上;4.对各组小鼠表观体征、脾指数变化、小肠组织形态学进行观察;5.应用PCR-DGGE方法对各组小鼠肠道菌群进行分析,对差异明显条带进行切胶回收、纯化、测序,测序结果经GenBank比对后确定细菌种类;6.应用ELISA方法对各组小鼠血清IgG、IFN-γ和IL-4水平进行检测;7.应用ELISA方法对各组小鼠肠粘液sIgA水平进行检测;结果:1.长期肠道菌群失衡对小鼠表观体征的影响三组(L、M、H)抗生素灌服小鼠出现粪便呈黄色、少动、精神萎靡、腹泻等症状。2.长期肠道菌群失衡对小鼠体重的影响灌服抗生素8天时,三组(L、M、H)抗生素灌服小鼠体重明显降低(p<0.05),随着时间推移,各组小鼠体重均有所上升;与正常对照组(C)比较,抗生素灌服组(L、M、H)小鼠体重虽有所增长,但增长幅度明显低于正常对照组(C)。3.长期肠道菌群失衡对小鼠脾指数的影响三组(L、M、H)抗生素灌服小鼠脾指数明显低于正常对照组(C)(p<0.05),且灌服剂量越大脾指数下降幅度越大。4.长期肠道菌群失衡对小鼠小肠组织形态的影响与正常对照组(C)比较,三组(L、M、H)抗生素灌服小鼠出现小肠绒毛肿胀、断裂、排列不规整等现象。5.长期灌服头孢曲松钠对小鼠肠道菌群的影响PCR-DGGE结果显示,与正常对照组(C)比较,三组(L、M、H)抗生素灌服小鼠肠道菌群存在显著差异(p<0.05),且抗生素灌服组小鼠肠道菌群条带数明显少于正常对照组。6.长期肠道菌群失衡对小鼠血清细胞因子的影响ELISA检测结果显示,与正常对照组(C)比较,三组(L、M、H)抗生素灌服小鼠血清IgG含量呈先升高后下降的趋势变化,血清IFN-γ含量间歇性升高,血清IL-4含量变化不明显,血清IFN-γ/IL-4比值先升高随后变化不明显。7.长期肠道菌群失衡对小鼠肠粘液sIgA的影响ELISA检测结果显示,与正常对照组(C)比较,三组抗生素灌服小鼠(L、M、H)肠粘液中sIgA含量明显降低(p<0.05)。结论:1.长期灌服头孢曲松钠可导致小鼠肠道菌群失衡,菌群多样性降低、数量减少;2.长期肠道菌群失衡导致小鼠生长缓慢和小肠组织损伤;3.长期肠道菌群失衡能导致脾脏组织改变,血清免疫分子IgG呈现先升高后降低的变化、IFN-γ呈现波动、IL-4变化不明显、肠粘液sIgA呈现一直降低等特征。