利福霉素B由地中海拟无枝酸菌A.Mediterrane产生，在生物合成过程中受芳香族氨基酸、利福霉素芳香前体C₇N的结构类似物及利福霉素SV的反馈调节。本文根据利福霉素B生物合成途径和代谢调节理论，对利福霉素B的产生菌进行了推理选育。出发菌种A.Mediterrane XCl-97经4次紫外诱变，再分别由0.1％的L-色氨酸、0.5％L-色氨酸、0.1％邻氨基苯甲酸和0.1％利福霉素SV进行药物耐受筛选，并用自然分离的方法进行复筛，获得变株A.mediterrane XC7-2，其摇瓶发酵单位达到12000u/ml以上，比出发菌株XCl-97提高了85％。 利用筛选到的菌种A.mediterrane XC7-2在15L发酵罐上按原发酵工艺进行发酵时，发酵单位与出发菌种A.mediterrane XCl-97相比没有相应提高，没能体现菌种优势。为激发突变菌种的产利福霉素B的潜力，进一步对发酵工艺进行优化。 采用摇瓶和15L发酵罐进行利福霉素B发酵，研究温度、溶氧、无机氮、巴比妥、磷酸盐、前体物质及补料方式对利福霉素B发酵的影响。结果表明控制培养温度27℃、溶氧25％以上的条件下，在培养基中以（NH₄）₂SO₄部分替代KNO₃，KH₂PO₄0.05％，采用流加补料工艺和补加前体工艺，利福霉素B的发酵单位较原工艺有明显提高，而巴比妥对利福霉素B的生物合成没有促进作用。经优化后的生产工艺已成功应用到60m³发酵罐中进行工业化生产，发酵单位达到22000u/ml以上，比原生产工艺提高了一倍以上。