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第一部分两轮荧光原位杂交技术应用的初步研究目的：在废弃胚胎中应用一快速、简便的单细胞核固定和两轮FISH检测技术，探究其可行性，同时分析植入前胚胎中非整倍体和嵌合体的发生情况。方法：收集本中心行IVF或ICSI不适合移植的第3天废弃胚胎24枚，每枚胚胎的卵裂球数目不少于4，在显微操作采用激光打孔法在胚胎透明带上打出合适的孔，然后用活检针对胚胎进行活检，使培养皿液滴中出现单个分散卵裂球。每个胚胎活检2～3个卵裂球转移至防脱载玻片上，采用HCL/Tween20方法进行核固定，核固定后，应用两轮FISH方法对8种关键染色体：13，15，16，18，21，22，X和Y进行分析，计算杂交成功率并分析非整倍体和嵌合体的发生情况。结果：两轮FISH均能见到较清晰的杂交信号；24枚胚胎共活检72个卵裂球，固定到69个核，核的固定成功率为95.8%，69个核中65个核信号诊断明确，其FISH杂交成功率为94.2%；24枚胚胎中，正常胚胎6枚，异常胚胎18枚，18枚异常胚胎中，多倍体胚胎2枚，单倍体胚胎1枚，非整倍体胚胎8枚，嵌合体胚胎7枚。结论：两轮荧光原位杂交方法在植入前第3天的废弃胚胎中成功地被应用，具有简单、快速、准确等特点。第二部分两轮FISH技术在植入前胚胎遗传学诊断中的应用目的：探究此两轮FISH技术、卵裂球活检以及核固定方法应用于临床16个PGD周期的可行性。方法：采用本中心常规控制性超排卵方案排卵，取卵后行卵母细胞浆单精子注射，受精第3天对胚胎发育情况进行观察，选择正常受精来源、胚胎卵裂球数目在6细胞以上，胚胎碎片20%以内的胚胎行卵裂球活检。采用HCL/Tween20方法进行核固定。根据患者染色体情况选择相应探针进行荧光原位杂交，活检后的胚胎转入囊胚期胚胎培养液（Cook，USA）中继续培养。最后根据FISH结果和第5天胚胎发育情况选择合适的胚胎移植。结果：16个周期共对染色体组成正常或平衡的27个胚胎进行宫腔内移植，共获得4例妊娠，妊娠成功率为25%。1例14天测尿HCG（+），现正在等待35天B超结果；另3例除1例为异位妊娠外，另2例均为正常单胎妊娠：1例患者尚在妊娠之中，另1名患者现已足月分娩一健康女婴，体重2800g，该婴儿为安徽省第一位通过“FISH法”种植前遗传学诊断技术诞生的染色体易位患者的后代。结论：说明通过此方法帮助具有高遗传风险夫妇获得健康后代是可行的，同时也说明本中心已具备开展PGD的能力。