水稻土多氯联苯厌氧生物降解研究初探

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多氯联苯具有高毒性、环境持久性与长距离迁移特性,能在生物体内富集并通过食物链得到放大,成为公众最为关注的全球性污染物。土壤是PCBs的主要归宿,而面积广大的水稻土是PCBs重要的受纳体,PCBs厌氧脱氯降解对于PCBs的彻底矿化至关重要。本论文首先以浙江省台州市典型PCBs污染水稻土为研究对象,通过室内模拟实验,研究不同水分处理对PCBs的消减影响;然后采用PCBs污染水稻土做富集源,富集得到PCBs厌氧脱氯微生物,考察其对PCBs的降解能力,结合分子生物学方法,研究了微生物群落结构情况;之后将脱氯富集培养体加入到多氯联苯的水稻土泥浆反应体系中,考察其厌氧降解PCBs的效果,并与新鲜水稻土中土著微生物的PCBs厌氧降解能力进行比较,结合分子生物学方法,研究了土壤中微生物群落结构的变化。主要研究结果如下:(1)从淹水-落干处理(F-D)、淹水处理(F)和落干处理(D)三种处理方式来看,淹水5cm深的淹水处理(F)更有利于高氯代PCBs的降解,保持60%含水率的落干处理(D)更有利于低氯代PCBs的降解;(2)采用微宇宙(microcosm)的培养方法,以PCBs污染土壤做种源,以商用PCBs混合物Aroclor1260为处理目标,经过数次厌氧转接培养,最终富集得到稳定的厌氧降解PCBs微生物。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ代富集培养体中Aroclor0260添加量为0.500、0.600、0.900mg,分别经过150、90、30d培养时间,Aroclor1260的总量消减量为0.347、0.201、0.514mg,总量消减率为69.4%、33.5%、57.1%。各氯代分析结果为:4、5氯代的低氯代PCBs含量没有增加,而高氯代6~8氯代PCBs显著下降,可能是由于富集微生物中可能存在同时具有脱氯和降解功能的微生物;(3)将富集培养体加入PCBs污染水稻土泥浆体系中,经过135d的厌氧脱氯反应,添加菌液组对Aroclor1260总浓度的去除率(39.6%)低于水稻土对照组(52.6%),但是45d时对Aroclor1260的去除速率更快。两组体系中各氯代PCBs肖减量情况均为:6氯消减量最高,其次为7氯、5氯,4氯和8氯消减量较低;(4)将富集培养体加入PCBs污染水稻土泥浆体系后,微生物群落结构发生较大变化。对富集培养体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ代样品和水稻土泥浆体系的DGGE图谱中特异性条带进行测序鉴定,并对它们进行了系统发育分析。对克隆所得序列进行分析发现,大部分克隆都属于Proteobacteria类群和Firmicutes类群,并且在属于这两个类群的克隆中发现了可能与多氯联苯、氯乙烯等有机污染物降解有密切关系的克隆,这两个微生物类群在受PCBs污染的土壤微生物生态系统中可能占有重要地位,并可能对土壤中PCBs的转化和代谢具有重要的作用。
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