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第一部分基于前列腺癌PC3细胞的靶向纳米超声造影剂的制备及体外寻靶实验研究目的:制备前列腺癌PC3细胞的纳米级靶向超声造影剂,观测其物理性质,并检测体外寻靶能力。方法:采用旋转蒸发法、机械震荡法[1,2]制成普通纳米微泡和生物素化纳米微泡,通过生物素-亲和素法将生物素化抗6次跨膜前列腺上皮抗原-1(six transmembrane epithelial antigen of the prostate,STEAP-1)抗体与生物素化纳米微泡连接制成靶向前列腺癌PC3细胞的纳米微泡造影剂,并利用免疫荧光观察结合情况;观察及检测微泡的形态、分布、粒径,及一周内粒径的变化情况;利用显微镜观察纳米靶向微泡对前列腺癌PC3细胞的体外靶向效果。结果:成功制得普通纳米微泡造影剂及载STEAP-1抗体的靶向纳米微泡造影剂,取适量涂片后于荧光显微镜下观察,靶向纳米微泡组镜下可见环状绿色荧光,而空白纳米微泡组镜下视野丢失;两种超声纳米微泡呈圆形,分布均匀,无聚集;一周后两种微泡粒径的变化无明显性差异(P>0.05)。体外寻靶实验中,靶向纳米微泡聚集在前列腺癌PC3细胞表面,预先用生物素化STEAP-1抗体处理的PC3细胞表面没有靶向纳米微泡聚集,用PBS缓冲液冲洗后,靶向纳米微泡仍聚集在细胞周围。结论:通过旋转蒸发法、机械震荡法和生物素-亲和素连接法可成功制备载STEAP-1抗体的靶向纳米微泡造影剂,此造影剂能够在体外与前列腺癌PC3细胞特异性靶向结合。第二部分靶向纳米超声造影剂对前列腺癌PC3细胞裸鼠移植瘤模型的增强显影实验研究目的:通过前列腺癌PC3细胞裸鼠移植瘤动物模型来检测靶向纳米超声造影剂的增强显影效果。方法:采用旋转蒸发、机械震荡法制成普通纳米微泡和生物素化纳米微泡,通过生物素-亲和素连接法将STEAP-1抗体连接于生物素化纳米微泡,制成载STEAP-1抗体靶向纳米微泡超声造影剂;建立前列腺癌PC3细胞裸鼠移植瘤模型,分别利用两种造影剂对裸鼠移植瘤进行超声造影,实时关注移植瘤造影剂灌注情况、分布特征,保存视频资料,并用QontraXt动态造影定量分析软件进行分析,获取峰值强度(Peak Intensity,PI)、达峰时间(Time to Peak,TP)、曲线下面积(Area under the Curve,AUC)及斜率(Sharpness)。结果:成功制得普通纳米微泡造影剂及载STEAP-1抗体靶向纳米微泡造影剂;成功建立前列腺癌PC3细胞移植瘤模型;体内增强显影结果表明,载STEAP-1抗体靶向纳米超声造影剂虽然持续时间较普通纳米超声微泡稍短,但其增强显影效果更明显。结论:通过旋转蒸发法、机械震荡法和生物素-亲和素法可成功制备载STEAP-1抗体的靶向纳米微泡造影剂;该靶向纳米微泡对前列腺PC3细胞裸鼠癌移植瘤具有靶向性,增强显影,有助于肿瘤的诊断。