腐殖酸钠凝胶剂对大鼠皮肤创伤愈合的影响

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皮肤创伤在兽医临床中是一种十分常见的疾病,皮肤出现创伤后,伤口部位血管破裂、血液渗出,可引发炎性反应甚至局部感染,严重者甚至出现毒血症、败血症等全身感染。研究表明腐殖酸钠具有抗菌、抗炎和促进伤口愈合等生物活性,但目前在兽医临床上将腐殖酸钠制成凝胶剂用于创伤治疗还未见报道。本研究是将制备的腐殖酸钠凝胶剂用于大鼠皮肤创伤的治疗,并观察其对大鼠皮肤创伤愈合的治疗效果。本研究共分两部分:(一)以腐殖酸钠为主药,制备腐殖酸钠凝胶剂;(二)本实验选用24只健康SD雄性大鼠,在大鼠背部剪取直径1cm的圆形创面两个,相隔2 cm,剪取皮肤全层,深度达皮下筋膜层。随机分为空白对照组和腐殖酸钠凝胶剂组。连续观察大鼠创面愈合的状况,并通过不同时间点对创伤的肉芽组织进行HE染色,采用免疫组化技术检测创面组织中胶原蛋白沉积情况,应用实时荧光定量PCR技术,检测Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白以及与创伤愈合的相关细胞因子m RNA的表达情况。实验结果如下:所制备的腐殖酸钠凝胶剂为质地均匀,细腻的黑色腐殖酸钠凝胶剂。经动物皮肤刺激性测试,表明本研究制备的腐殖酸钠凝胶剂对皮肤无刺激性。将该自制凝胶用于大鼠创伤的治疗,证明腐殖酸钠凝胶剂可以保持创面润湿。通过对皮肤创面愈合率的计算,结果证明,在试验的第9和14天,腐殖酸钠凝胶剂组的创伤创面愈合率显著高于对照组(p<0.05),表明腐殖酸钠凝胶剂能够加速皮肤创面的愈合。通过对创面组织HE染色,创伤后第7天,腐殖酸钠凝胶剂组相对于对照组肉芽组织中新生血管相对较多,创伤后第9天,腐殖酸钠凝胶剂组上皮化程度较高且部分已上皮化完全,大部分肉芽组织趋于成熟。免疫组织化学检测的结果显示,腐殖酸钠凝胶剂组Ⅰ型胶原蛋白表达含量在创伤后第7天、9天均高于空白对照组(P<0.05)。创伤后第3天,第9天腐殖酸钠凝胶组Ⅲ型胶原蛋白表达量明显高于空白对照组(P<0.05)。对大鼠皮肤创伤新生肉芽组织中相关基因检测发现,与对照组相比,腐殖酸钠凝胶剂组Ⅰ型胶原蛋白,Ⅲ型胶原蛋白,血管内皮生长因子,成纤维细胞生长因子,肝细胞生长因子以及转化生长因子的表达显著增加,表明腐殖酸钠凝胶剂能够提高皮肤愈合的相关生长因子的表达。综上所述:本研究成功制备了腐殖酸钠凝胶剂,该制剂对皮肤组织无刺激性。制备的腐殖酸钠凝胶剂可以促进大鼠皮肤创面的修复,加速创面愈合。并促进了皮肤Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、血管内皮生长因子、成纤维细胞生长因子和转化生长因子等相关因子的表达。结果证明腐殖酸钠凝胶剂在治疗皮肤创伤愈合过程中具有良好的效果,为临床应用奠定理论基础。
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