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抗生素在家禽集约化生产中被广泛使用,不仅用来预防动物疾病,而且用来提高动物的生长性能。近年来,由于抗生素耐药性和在畜产品中的残留问题,许多国家开始在禽类生产上禁止使用饲用抗生素。目前,家禽生产面临许多饲料源隐患因子和疾病的问题,例如非常规饲料原料中的抗营养因子、贮存时间长的陈化原料和球虫病。有机酸作为一种抗菌性物质,可以调节肠道p H值和菌群结构;本论文通过3个试验研究复合酸化剂对小麦-豆粕型饲粮、陈化玉米和球虫应激条件下肉鸡生产性能、抗氧化功能和肠道免疫功能的影响及作用机制。试验1在饮水和/或饲粮中添加有机酸对肉鸡生产性能和肠道健康的影响本研究旨在探讨在饮水或饲粮中添加酸化剂及二者联用对肉鸡肠道健康的影响。试验采用单因子完全随机区组,设5个处理组;处理1(NC)为负对照组,处理2(PC)为NC+抗生素组,处理3(NCS)为NC+饮水酸化剂处理组,处理4(NCP)为NC+饲粮酸化剂处理组,处理5(NCSP)为NC+饮水酸化剂+饲粮酸化剂处理组。PC为在NC饲粮中添加10 mg/kg维吉尼霉素;NCS为饲喂NC饲粮,同时饮水中添加0.15%复合酸化剂(由甲酸、乙酸和甲酸铵组成);NCP为在NC饲粮中添加复合酸化剂(由丁酸盐、中链脂肪酸、山梨酸和酚类化合物组成;1-21天,添加0.15%;22-42天,添加0.10%);NCSP为NCS和NCP的联用。试验的基础饲粮(NC)采用小麦-豆粕型基础饲粮。选用1500只1日龄肉鸡(Ross 308),按体重随机分为5个处理,每个处理15个重复,每个重复20只鸡。结果发现,试验第1-21天,PC组21日龄肉鸡体重和阶段体增重显著高于NC组(P<0.05);与NC相比,NCP和NCSP组显著降低了21日龄肉鸡体重和体增重(P<0.05)。PC与NC组FCR无显著差异,但NCS、NCP和NCSP组FCR显著高于NC组(P<0.05)。与其他处理组相比,NCS组的死亡率显著降低(P<0.05)。试验第22-42天,所有处理42日龄肉鸡体重无显著差异;与NC组相比,NCS和NCSP组的FCR显著降低(P<0.05)。试验第1-42天,不同处理肉鸡体增重、采食量和FCR均无显著差异。试验第21天,不同处理脚垫评分和垫料湿度无显著差异;但试验第42天,与NC组相比,NCS组脚垫评分和垫料水分显著降低(P<0.05);NCSP组脚垫评分显著降低,垫料水分也下降,但未达到显著水平。试验第21天,NC组血浆CAT活性显著高于NCS和NCSP(P<0.05),但与PC和NCP组无显著差异。NC组肝脏GSH-Px和SOD活性显著高于PC组(P<0.05);NCS和NCP组肝脏MDA和T-AOC水平显著升高(P<0.05)。NC和NCP组胸肌中GSH-Px活性显著升高(P<0.05)。除了NCS组外,NC处理增加了组织MDA含量(P<0.05),但NC、PC和NCS组T-AOC高于NCP和NCSP组。NC组血浆中AST活性显著升高(P<0.05)。试验第42天,与NC相比,饮水或/和饲粮中添加酸化剂降低了肝脏和胸肌中GSH-Px活性(P<0.05);但不同处理组血浆、胸肌和肝脏的其他与抗氧化相关的指标均无显著差异。与其他处理相比,NCSP组21日龄肉鸡血浆中总胆固醇(TC)和高密度脂蛋白(HDL-C)显著降低(P<0.05);其血浆低密度脂蛋白(LDL-C)浓度显著低于PC、NC和NCP组(P<0.05)。试验第42天,所有处理血液TC、HDL-C和LDL-C含量均无显著性差异。试验第21天,PC组空肠的绒毛高度(P=0.018)、隐窝深度(P=0.055)和杯状细胞数量(P=0.039)最低,NCP组绒隐比最高(P=0.058);试验第42天,所有处理的空肠形态指标和杯状细胞数量均无显著差异。试验第21天,添加酸化剂增加了回肠乙酸(P=0.053)和丁酸(P=0.030)及盲肠丁酸的含量(P<0.001);试验第42天,与NC组相比,饮水或/和饲料中添加酸化剂提高了回肠中丁酸含量,但只有NC和NCS组间差异显著(P<0.05)。饮水或/和饲料中添加酸化剂显著提高了盲肠中乙酸和丙酸含量(P<0.01)。不同阶段不同处理组空肠紧密连接蛋白m RNA表达量无显著差异。与NC组相比,NCP和NCSP组胸肌滴水损失显著降低(P=0.05);但不同处理肌肉颜色无显著差异。试验第42天,尽管不同处理肠道绒毛高度、隐窝深度和绒隐比及紧密连接蛋白m RNA表达无显著差异,但饮水或/和饲料中添加酸化剂改善了肠道形态和紧密连接蛋白m RNA表达。试验第21天时,16S r RNA测序结果表明,在门水平上,NCP组盲肠软壁菌门(Tenericutes)比例显著提高(P=0.048);在属水平上,NCS组拟杆菌属(Bacteroides)比例显著高于NC和NCP组(P=0.045);NCP组Alistipes比例显著高于NCS和NCSP组(P=0.044)。在科水平上,NCS和NCP组毛螺菌科(P=0.05)比例显著高于NCSP组。在种水平上,NCS和NCSP组Bacteroides fragilis(P=0.0004)和NCS组Bacteroides uniformis(P<0.001)比例显著升高。试验第42天,NC和NCSP组盲肠Ruminococcaceae和Enterobacteriaceae含量高于其他各组(P<0.02);NCSP组大肠杆菌(E.coli)的数量高于其他组(P=0.01)。以上结果表明,添加酸化剂改变了生长前期肉鸡的肠道菌群结构,提高了机体的抗氧化能力,这可能是其提高了后期肉鸡的生产性能的原因。试验2:在饮水和/或饲料中添加有机酸缓解陈化玉米对肉鸡健康的负面影响本试验旨在通过在饮水中和/或饲料中添加酸化剂来缓解陈化玉米对肉鸡健康的负面作用。试验采用完全随机区组设计,设5个处理组。将600日龄肉鸡(Ross 308)按体重随机分为5个处理,每个处理6个重复,每个重复20只鸡。试验处理分别为:NC,正常玉米饲粮;AC,陈化玉米饲粮;ACW,AC+饮水中添加酸化剂;ACF,AC+饲粮中添加酸化剂;ACWF,AC+在饲料和饮水中同时分别添加两种酸化剂。试验分第1-21天和第22-42天两个阶段。ACW为饲喂AC饲粮,同时饮水中添加0.15%复合酸化剂(由甲酸、乙酸和甲酸铵组成);ACF为在AC饲粮中添加复合酸化剂(由丁酸盐、中链脂肪酸、山梨酸和酚类化合物组成;1-21天,添加0.15%;22-42天,添加0.10%);ACWF为ACW和ACF的联用。试验结果表明,试验第1-21天,添加陈化玉米显著降低了21日龄肉鸡体重和阶段体增重,增加了FCR(P<0.01),但对采食量无显著影响。第22-42天,ACW和ACWF组采食量显著增加;ACW和ACWF组42日龄肉鸡体重也高于AC组,但未达到显著水平。NC与AC组的脚垫评分和垫料水分无显著差异;但ACW和ACWF组脚垫评分降低。试验第21天,陈化玉米降低了肉鸡肝脏GSH-Px活性,提高了MDA含量和T-AOC;试验第42天,肉鸡肝脏GSH-Px活性也有相似的结果,但在饮水和饲粮中添加酸化剂对其他抗氧化相关指标无显著影响。陈化玉米增加了21日龄肉鸡空肠绒毛高度,降低了杯状细胞(GC)数量;饲粮中添加酸化剂增加了绒毛高度,但对隐窝深度、绒隐比和GC数量无显著影响。陈化玉米降低了42日龄肉鸡的绒隐比,添加酸化剂对其无显著影响。添加酸化剂增加了21日龄肉鸡空肠ZO-1 m RNA的基因表达,但42日龄时无显著影响。陈化玉米增加了21日龄肉鸡回肠乙酸、丙酸和丁酸含量和42日龄肉鸡回肠丙酸和丁酸含量。添加酸化剂降低了42日龄肉鸡回肠丙酸含量。不同处理21日龄肉鸡盲肠中乙酸、丙酸和丁酸的含量无显著差异;陈化玉米降低了42日龄肉鸡盲肠中丙酸含量;与AC相比,添加酸化剂降低了盲肠中丙酸含量。陈化玉米增加了肉鸡盲肠中变形菌门(P=0.05)、Fusobacteria(P=0.01)和Acidobacteria(P=0.05)比例;添加酸化剂降低了以上菌群的比例。以上结果表明,陈化玉米为肠道健康产生负面作用;添加酸化剂后改善了肉鸡肠道形态和回肠中挥发性脂肪酸的组成。试验3饮水或饲粮中有机酸对球虫攻毒肉鸡生长性能、肠道形态和免疫功能的影响本试验旨在探讨饮水或饲料中的添加酸化剂对球虫攻毒肉鸡健康的作用。试验采用2×3两因子完全随机的区组设计,饲粮包括3种处理方式,分别为基础饲粮(CON),基础饲粮+饮水用酸化剂(OAW)和基础饲粮+饲粮用酸化剂(OAF);球虫攻毒分为攻毒与不攻毒2种处理方式。选用360只1日龄肉公鸡(Ross 308),按体重随机分为6个处理,每个处理6重复,每个重复10只鸡。试验第8天,所有球虫攻毒组肉鸡口服50倍免疫剂量的球虫疫苗,然后试验第18和29天采集血浆和空肠样品。结果发现,无论球虫攻毒与否,在饲粮或饮水中添加酸化剂显著提高了d1-21、d22-35和d1-35天肉鸡的体增重,降低了d1-21、d22-35和d1-35天肉鸡的FCR;但饮水与饲粮中添加酸化剂组间无显著差异。球虫攻毒显著降低了21和35日龄肉鸡的体重、d1-21和d1-35天肉鸡体增重和采食量,增加了d1-21和d1-35天FCR(P<0.05)。除Ig G外,球虫攻毒和添加酸化剂对血浆中免疫相关指标均无互作效应;在未球虫攻毒情况下,饲粮中添加酸化剂显著提高了血浆中Ig G水平(P=0.03),但是在攻毒情况下无显著差异。与其他组相比,饲粮中添加酸化剂提高了18日龄肉鸡血浆TNF-γ水平(P=0.006)。球虫攻毒降低了18日龄肉鸡血浆中TNF-γ(P=0.01)和IL-10水平(P<0.001),但显著增加了Ig M(P=0.03)、Ig G(P=0.04)和Ig A(P=0.02)水平;但不同处理血浆TNF-α和IL-12含量无显著差异。球虫攻毒增加了29日龄肉鸡血浆中Ig M和Ig A水平;但不同处理血浆中TNF-α、TNF-γ、IL-2、IL-10和Ig G均无显著差异。球虫未攻毒组的肉鸡空肠形态无明显损伤。但在球虫攻毒情况下,与对照组相比,OAWC和OAFC组肉鸡空肠损伤评分显著降低;OAFC组优于OAWC组(P<0.0001);试验第29天也有相似的结果。球虫攻毒和添加酸化剂的互作对肉鸡肠道形态无显著影响;添加酸化剂对空肠形态也无显著改善。球虫攻毒增加了19和29日龄肉鸡空肠的隐窝深度,降低其绒隐比,但对其绒毛高度无显著影响。球虫攻毒降低了19日龄肉鸡空肠中杯状细胞的数量,但29日龄时,球虫攻毒与未攻毒组无显著差异。盲肠菌群16S r RNA测序表明,在门水平上,球虫攻毒降低了18日龄肉鸡盲肠中Lactobacillus_reuteri(P=0.02)比例,降低了29日龄肉鸡盲肠种Cyanobacteria(P=0.014)比例。在属水平上,球虫攻毒降低了乳酸杆菌(P=0.036)和unidentified Cyanobacteria(P=0.01)比例。球虫攻毒增加了Candidatus Arthromitus(P=0.0008)比例,降低了Phaseolus vulgaris(P=0.01)比例。以上结果表明,在饮水或饲粮中添加酸化剂均提高了肉鸡的免疫功能;饮水或饲粮中添加酸化剂对改善肉鸡球虫攻毒引起的负面作用具有相似的效果。综合三个试验的研究结果,饮水或/和饲粮中添加酸化剂可提高机体抗氧化功能、改善肠道形态和菌群结构,进而缓解不同应激源对肉鸡健康的危害。