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目的：生物的生命活动存在周期性的变化规律即生物节律(biorhythm)。此节律普遍存在于自然界中，是包括人类在内所有生物的基本特征。按照周期长短，生物节律可分为三种类型：(1)超日节律(ultradian rhythm)，节律周期明显短于24小时，一般短于20小时；(2)近日节律(circadianrhythm)，节律周期接近24小时；(3)亚日节律(infradianrhythm)，节律周期周期显著长于24小时，一般长于28小时。近日节律的发生远比其他两种常见，人体各种生理现象和病理事件的发生均表现为典型的近日节律特征。此节律是内源性的，同时又受到其他外界信号的导引。内外两种因素共同作用，维持机体内环境与外界变化相协调。
近年来研究发现，生理状态下健康人的血压呈现昼高夜低的近日节律特征，此特征在维持机体正常生理功能中起到重要作用。越来越多的证据表明，高血压患者血压的昼夜节律特征与患者发生靶器官损害的危险性密切相关。血压昼夜节律异常时，发生心脑肾并发症的风险明显升高。因此，充分认识血压的近日节律特征，深入探讨生物节律调节机制，对于更好的防治高血压及其并发症具有重要意义。血压调节是一个极其复杂的过程，在此过程中肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin sytem，RAS)的各种活性物质起着至关重要的作用。业已证实，RAS系统各组分的活性水平亦呈典型的近日节律。近年来国外一些学者研究发现，RAS的近日节律与血压昼夜节律关系密切。时间治疗学(chronotherapeutics)是一门较新的学科，其主要内容是针对人体的时间生物学特点，选择合适的药物制剂及合理的给药时间或通过特定的给药技术，使药物作用与疾病发生的节律相一致，从而达到优化治疗效果、降低药物不良反应的目的。时间治疗学在高血压治疗中占有重要地位。目前关于常用降压药物对血管活性物质生物节律影响知之甚少，在此背景下我们以大鼠为模型，以不同时间灌服比索洛尔为干预因素，旨在探讨RAS系统的近日节律特征及不同时间喂药对其的影响。
方法：清洁级健康雄性Sprague-Dawlay(SD)大鼠128只，随机分为四大组：早07:00对照组(MC)；晚07:00对照组(NC)；早07:00灌药组(MT)；晚07:00灌药组(NT)。灌药组每日给予比索洛尔3mg/Kg，正常对照组每日给予相同体积的蒸馏水。每大组各32只，又分为4小组，每小组各8只。适应性饲养2周后开始按上述方案饲养喂药。4周后分别于同日24小时内不同时间点(02:00，08:00，14:00，20:00)用鼠尾测压仪测量各组大鼠血压并处死四大组中的各一小组大鼠并取材。在相应的条件下留取血浆、血清及心肌组织。应用放射免疫法检测大鼠血浆PRA、AngII、血清ACE及心肌中的AngII的活性和浓度；通过反转录PCR技术测定AT1-mRNA的表达水平。应用余弦拟合法(cosine fitting)分析并比较4组实验动物间PRA、AngII含量及ACE活性的时间生物学特征。采用零振幅检验[2](zero amplitude test)评价各检测指标的近日节律是否存在。应用方差分析比较各均值之间差异的显著性，如p＜0.05则视为有统计学差异。
结果：
1.方差分析显示，早、晚喂药组与早、晚对照组血压昼夜平均水平无明显差别(p＞0.05)，早、晚喂药组血压平均水平亦相近。在02:00时喂药组血压显著低于对照组(p＜0.05)，且晚喂组药低于早喂药组，其他时间点各组间无明显差别(p＞0.05)。余弦拟合分析及零振幅检验显示，早、晚喂药组及早、晚对照组均存在典型的近日节律。早、晚喂药组血压的峰值相位分别出现在21:52、21:47：早、晚对照组峰值相位分别出现在21:10、21:40。早、晚喂药组较早、晚对照组振幅降低，且晚喂药组低于早喂药组，分别为10.7、4.4、16.3、15.8。
2.对早、晚喂药组及早、晚对照组血液中PRA、ACE、AngII及心肌组织AngII行方差分析，结果显示四者昼夜平均浓度或活性水平均为喂药组低于对照组(p＜0.05)。且晚喂药组低于早喂药组(p＜0.05)。
3.对早、晚喂药组及早、晚对照组大鼠心肌组织AT1mRNA平均表达水平进行方差分析，结果显示，四组间无显著差别(p＞0.05)。
4 应用最小二乘法分别对早、晚喂药组，早、晚对照组血液中PRA、ACE、AngII及心肌组织AngII检测值进行余弦拟合，得出各自拟合曲线的特征值。经零振幅检验显示，各测量值均呈现近日节律特征(各组值均为p＜0.05)。早、晚对照组及早、晚喂药组PRA峰值相位分别出现在13:33、13:36、16:44、17:20；血清ACE峰值相位各组分别出现在16:31、16:04、18:37、18:57；血浆AngII分别出现在17:28、17:11、19:13、20:05；心肌组织AngII分别出现在15:55、15:41、16:53、17:57。由此可见各指标喂药组较对照组峰值相位均延迟，但延迟程度有所差别，且血液中PRA、ACE、AngII峰值相位有时间顺序性。血液中PRA、ACE、AngII及心肌组织AngII早、晚喂药组较早、晚对照组余弦拟合曲线振幅减小，且血清ACE变化较其他活性物质变化较弱。 5 余弦拟合分析及零振幅检验显示，早、晚喂药组及早、晚对照组心肌组织AT1mRNA表达水平均呈现近日节律特征(各组均为p＜0.05)。各组峰值相位分别出现在16:08、16:35、00:32、02:42。各组节律的振幅数值接近，无显著差异。
结论：
1.SD大鼠比索洛尔喂药组与对照组的24小时血压均值之间没有差异，但喂药组02:00血压较对照组明显降低。早晚不同时间喂药对血压影响无差别。喂药组与对照组血压均存在近日节律，但喂药组较对照组血压峰值相位延迟，且晚喂药组更明显。
2.比索洛尔喂药组血液中PRA、ACE、AngII昼夜平均浓度或活性水平显著低于对照组；心肌组织AngII浓度亦呈现此种趋势；不同时间喂药对PRA、ACE、AngII的浓度影响相似，即早喂药组与晚喂药组无明显差异。
3.血清PRA、ACE、AngII水平及活性均具有近日节律性，三者节律的基本特征相似。比索洛尔不同时间喂药PRA、ACE、AngII近日节律(主要表现在相位移位、振幅波动)改变程度不同，ACE昼夜波动幅度相对较弱。喂药组较对照组峰值相位后移，振幅降低；晚喂药较早喂药上述特征更突出。
4.比索洛尔不同时间喂药对大鼠心肌组织内AT1mRNA表达水平无影响。喂药组与对照组均存在典型的昼夜节律，前者峰值相位出现较晚，且振幅降低。早喂药组与晚喂药组亦存在差异，即晚喂药组峰值相位出现更迟，但振幅相同。此结果提示RAS各组分浓度或活性的昼夜节律发生在分子水平上。上述结果表明，大鼠血液及心肌组织PRA、ACE、AngⅡ的浓度及活性与心肌组织AT1mRNA表达水平均具有近日节律性，且各指标的节律特征相似。比索洛尔不同时间喂药影响RAS各组分近日节律及心肌组织AT1mRNA近日节律，使峰值相位后移，振幅降低，且晚喂药影响更为显著。RAS各组分浓度及活性的昼夜节律可能发生在分子水平上。