昆虫病原线虫Steinernema和Heterorhabditis属线虫是新型的生物杀虫剂。这类线虫的商业化需要改进其贮存方法以及了解贮存过程中的功能基因。　　 本论文尝试建立昆虫病原线虫的渗透压溶液诱导的液体贮存新方法；分析渗透压诱导后昆虫病原线虫感染期(IJs)虫态的基因的差异表达；并在大肠杆菌原核系统表达与渗透压脱水相关的昆虫病原线虫Sfeltiae SN品系的LEA(Lateembryogenesis abundant protein)蛋白，为这类生物杀虫剂的大量贮存创新方法，同时为这类线虫的功能基因的研究提供参考。　　 一，以不同浓度的离子型(增强型人造海水)和非离子型(6.4mol/L甘油)渗透压混合溶液诱导昆虫病原线虫S.carpocapsaeAll品系，测定其贮存过程的死亡率，并测定不同感染期线虫浓度(5×105，2.5×105，2000IJs/mL)和诱导温度(30℃，25℃，10℃)对线虫渗透压贮存后的耐热能力(线虫在渗透压溶液中诱导72小时后置于45℃下4小时的死亡率，HTA)的影响。两类渗透压溶液的7种不同比例的组合(编号：溶液A-G，清水对照为H)在25℃下处理昆虫病原感染期线虫6-9小时后，处理线虫停止活动，虫体皱缩：21天后，线虫的死亡率分别为：13.2％，16.2％，16.7％，13.5％，25.2％，31.6％，44.6％，1.0％。表明所配制的渗透压溶液可用于贮存昆虫病原线虫S.carpocapsaeAl1。渗透压诱导处理提高了感染期线虫的耐热能力，且线虫死亡率随线虫浓度的增大和温度的升高而升高。不同浓度(5×105，2.5×105，2000IJs/mL)的感染期线虫诱导后经热处理后的死亡率分别超过88.4％，62.3％，2.4％；于溶液D中线虫的死亡率最高，分别为98.0％，85.9％，11.6％；于溶液B中线虫的死亡率最低，分别为86.6％，62.3％，2.4％。在三种诱导温度条件下，热处理U的死亡率以10℃诱导的组合最低，在溶液A、B、C、D中的死亡率分别为56.8％，54.9，80.5％，78.0％。未经诱导的线虫全部死亡。在高线虫浓度低温条件下(Sx10sIJs/mL，10℃)贮存42天后，溶液A，B，C，D与清水对照H中的线虫死亡率没有显著差异，分别是7.19％，5.97％，4.41％。4.34％.4.34％。　　 二.以差异表达方法测定渗透压溶液B(0.05mL人造海水+0.25mL6.4mol/L甘油)诱导后的无菌昆虫病原线虫S.carpocapsaeA24品系的差异表达基因。以GeneRacerKit和TopoTAcloneKit构建cDNA文库，从288个克隆中获得39个差异表达的克隆，这些克隆片段的DNA序列业已测定，对比Genebank(http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/)对这些序列进行分析。结果显示：这些克隆序列以蛋白的功能分为9类，包括酶类(12个)、离子通道类(3个)、脱水保护蛋白类(2个)、转运蛋白类(1个)、调节因子类(3个)、线粒体蛋白类(3个)、rRNA蛋白类(4个)、未知功能蛋白类(6个)、无相似序列类(4个)。离子型的溶液和非离子型的溶液混合诱导昆虫病原线虫产生相应的离子通道蛋白、脱水保护蛋白两类蛋白的差异表达。这是第一次在昆虫病原线虫中发现有离子通道蛋白在渗透压诱导脱水过程中差异表达。　　 三.以渗透压溶液B诱导线虫S.feltiaeSN后提取总RNA，RT-PCR扩增lea基因；分离的lea基因的cDNA有366bp，与Genbank中的S.feltiaeIS-6的lea基因的同源性为71％；利用pET-15b为表达载体于大肠杆菌EscherichiacoliBL21(DE3)中成功表达了LEA融合蛋白。　　 SDS-PAGE以及Westem印迹分析均证实了LEA蛋白的表达。LEA蛋白的原核成功表达将为今后研究这个蛋白的功能提供基础。