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为了进一步探讨青霉素类抗生素过敏反应机制,本试验进行了以下三个方面的研究。 一、T细胞系对不同抗原的增殖反应 为探讨T淋巴细胞对抗原的特异性,研究了9种青霉素过敏原对青霉素过敏病人外周血淋巴细胞增殖的影响。选用26例受试者,其中青霉素类过敏病人16例,正常对照10例。分离出受试者外周血单个核细胞(PBMCs),用青霉素G(PG)钠盐及其侧链苯乙酸(PHA)、青霉素V(PV)钾及其侧链苯氧乙酸(PHOA)、氨苄西林(AMP)及其侧链α-氨基苯乙酸(NPG)、阿莫西林(AX)及其侧链对羟基-α-氨基苯乙酸(PHPG)和青霉素类抗生素母核6-氨基青霉烷酸(6-APA)作为抗原对PBMCs进行刺激,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定T细胞系(TCLs)的增殖情况。试验证明上述9中抗原对TCLs增殖阳性率分别为68.75%、50%、56.25%、37.5%、50%、37.5%、37.5%、31.25%和43.75%。 郑州大学2002年硕士毕业论文 青霉素类抗主素过敏反应机制的研究 根据TCLS对抗原的特异性可将其分为两类:一类是抗原非特异性TCLS,对多种抗原发生增殖反应;另一类为抗原特异性TCLS,仅对一种抗原哟物、侧链或母核)发生增殖反应。 二、细胞因子和过敏反应 为了研究过敏病人血清中的总 Igs、细胞因子和过敏反应类型的关系。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测了47例过敏病人血清 中的几 -4、IL-5和 IFN-Y。 将过敏病人分为速发型过敏反应组门 例)和迟发型过敏反应组门 例人 以正常人为对照。试验证明,上述三组血清几-4、1卜5 才1*NY水平分别为0二*O.15、0.29幼二二 禾0*7L0*2;0.1010二 0、0*9*0*4 和 0*5f0*2;0.19LO.14。0.34划.18和0.门划*5。万差分析各组IL4、1卜5、IF付Y结果表明,两组过敏病人血清中IL*、迟发型过敏反应组IFN-Y均明显高于对照组中叱.05或尸功.01人迟发型过敏反应组L-4。IFN-Y明显高于速发组中<0刀5人三组之间的血清IL巧水平无显著性差异中>O.0引。 结果表明,速发型过敏反应与IL*关系密切;而迟发型过敏反应则与IL4、IFN-Y增高有关。 三、T淋巴细月 IL-4、IFN-Y mRNA白表达 为进一步研究青霉素类抗生素过敏反应和细胞因子的关系,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RTICR)检测 14例过敏病人(速发型7例、迟发型7例)和门例对照者T细胞内IL一、IFN-Y mRNA的表达。试验证明,速发型过敏反应组有 4 、2- 郑州大学2002年硕士毕业论文 青霉素类抗生素过敏反应机制的研究例,迟发型过敏反应组、正常对照组各有1例T细胞中IL*mMA有表达;速发型过敏反应组有6例,迟发型过敏反应组有 2例,正常对照组有 1例 T细胞内有r.Y mRNA表达。 结果表明,速发型、迟发型青霉素类抗生素过敏病人的T细胞体外受刺激后同时分泌 IL4、IFN-Y。 四、细胞因子和 lgE、IgG抗体 为了研究细胞因于和抗体的关系,用放射过敏原吸附试验 门AST ). ELISA测定34例有过敏病史病人血清中的特异性IgE、IYG抗体和总工* 抗体,并比较其与 IL-4、IL-5禾 IFN-Y的关系。 试验证明,有青霉素过敏史的病人血清特异性 lgE抗体。lgG抗体、总工吵抗体与几-4和工 FN-g高度相关,其相关性与血清中特异性蛇E抗体是否阳性无关。提示细胞因子广泛参与速发型和迟发型过敏反应。 结论:青霉素类抗生素及其侧链、母核均可刺激过敏病人T细胞,使其发牛增殖反应。过敏病人的TCLS可分为抗原特异性TCLS和抗原非特异性TCLS。青霉素类抗生素速发型过敏反应与血清IL4关系密切,迟发型过敏反应则与IL*、IFN- Y增高有关;而两种类型过敏病人外周血T细胞体外受到抗原刺激后同时有 IL4、IFN-Y mRNA表达。青霉素类抗生素过敏病人血清中特异性 Ign抗体、Igo抗体和总 Igs抗体与几一。IFN-Y高度相关。