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目的：本课题利用体外培养人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells, HUVECS),观察ANGⅡ处理下,细胞内JNK/c-Jun通路的激活情况,并通过抑制JNK/c-Jun通路,观察下游SREBP-1、DDAH-1蛋白质水平的变化及ADMA和NO水平的变化,从而探讨JNK通路在ANG Ⅱ影响DDAH/ADMA/NOS系统中的作用,为阐明ANG Ⅱ引起NO水平变化提供新的视角。方法：体外培养细胞株HUVECs,同步化处理后,加入不同浓度的ANG Ⅱ,孵育24小时,用Western blot检测p-JNK, p-c-Jun表达水平的改变,从而观察有无JNK/c-Jun信号通路的激活。以最大程度激活JNK/c-Jun通路的ANG Ⅱ处理浓度为最佳处理浓度。加入上述最佳处理浓度的ANG Ⅱ处理HUVECS不同时间,用Western blot检测p-JNK, p-c-Jun表达水平的改变,找出可以最大程度激活JNK通路的ANG Ⅱ最佳处理时间。用以上最佳处理浓度与处理时间的ANG Ⅱ处理HUVECs,用Western Blot检测p-c-Jun, SREBP-1, DDAH-1水平。用高效液相色谱法测定细胞上清液中ADMA水平,DDAH总活性。硝酸还原酶法测定细胞上清液中NO水平。用JNK阻断剂SP600125处理内皮细胞后,用Western Blot检测p-c-Jun, SREBP-1, DDAH-1水平。用高效液相色谱法测定细胞上清液中ADMA水平,,DDAH总活性。硝酸还原酶法测定细胞上清液中NO水平。结果：与对照组相比,不同浓度与时间ANGⅡ处理下,JNK与c-Jun的磷酸化水平表达均增高。在ANGⅡ处理浓度为10-6M,处理时间为24小时时,JNK与c-Jun的磷酸化表达达到高峰。表明在HUVECS中,ANG Ⅱ可引起JNK/c-Jun通路的激活。在对ANG Ⅱ影响下,JNK通路对SREBP-1, DDAH-1DDAH总活性,ADMA含量,NO含量调节的研究中发现：(1)与无抑制剂处理组相比,加入JNK抑制剂SP600125处理后,SREBP-1表达无明显差异,表明JNK通路在HUVECS中不参与对SREBP-1的调节。(2)与无抑制剂处理组相比,；加入JNK抑制剂SP600125处理后,DDAH-1的表达明显增高,表明JNK通路参与调节ANGⅡ引起的DDAH-1表达降低。(3)与无抑制剂处理组相比,加入JNK抑制剂SP600125处理后,DDAH活性明显增高,ADMA含量降低,NO含量增高,表明阻断JNK通路参与调节ANGⅡ导致的DDAH活性下降,ADMA聚积,NO生成减少。结论：1.ANG Ⅱ在HUVECS中可引起JNK通路的激活。2.JNK/c-Jun通路不参与HUVECS中SREBP-1的表达调节3. JNK/c-Jun通路参与调节ANG Ⅱ引起的DDAH-1表达降低。4.JNK/c-Jun通路参与ANGⅡ对DDAH活性,ADMA及NO含量的调节。