神经递质分子电化学测定的新方法研究

被引量 : 0次 | 上传用户:lily1988122
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
神经递质分子,是神经系统神经通讯的化学信使,在神经转导和信息调控方面起着重要的作用。测定神经递质分子的含量及其变化,无论是在神经生理学研究方面,还是疾病诊断及相关药物的质量控制方面都具有重要的实际意义。但是,在生物样品中其浓度低(nM级别),存在时间短(有时毫秒级别),干扰分子多,故其检测是具有挑战性的课题。电化学分析技术具有快速、灵敏、简便、无毒、低成本和原位在线检测等特点,在临床病理诊断、环境监测、药物分析等领域日益受到了化学家和生物学家的重视和关注,碳纤维微电极和丝网印刷电极由于具有体积小,方便等优点,常用作电化学分析的基底电极。新型的碳纳米材料石墨烯、碳纳米管及多孔碳由于具有特殊的空间结构及优异的性能,已广泛用于光、电、磁、生物医药、催化、传感器、储能等诸多领域。本论文以石墨烯为基础,构建了基于石墨烯的神经信使分子传感器,利用多孔碳的尺寸选择性,探讨了氧和药物分子的竞争性电化学反应。本论文的主要研究工作如下:(1)利用石墨烯优良的电化学特性构建了石墨烯-碳纤维微电极传感器,并测定了小鼠海马组织中的多巴胺。在生理pH条件下,以铁氰化钾为电化学探针研究了该微传感器的电化学行为,以及抗坏血酸(AA)、多巴胺(DA)、尿酸(UA)三种生物分子的循环伏安特性。循环伏安法表明,DA的浓度在1.0×10-8-1.0×10-4M范围内,氧化峰电流与浓度呈良好的线性关系,检出限为1.0×10-8M,对DA有很好的选择性,AA和UA均不干扰测定。该微传感器用于测定了惊厥模型小鼠的海马组织中多巴胺的释放,所得结果与药理实验一致,为活体中多巴胺的测定提供了一种新方法。(2)利用π-π相互作用制备了石墨烯-四磺酸基酞菁铁(GR-FeTSPc)复合物,该复合物显示出很好的水溶性。该复合物与碳纤维微电极构建了GR-FeTSPc/CFME微传感器,在生理pH条件下,微传感器对DA和5-羟色胺(5-HT)显示了强的电催化作用。循环伏安法显示两峰电位差为210mV,能进行DA和5-HT的同时测定。差分脉冲伏安法研究了DA和5-HT的分析化学特性,固定DA,5-HT的浓度在4.0×10-7-1.0×10-5M范围内,峰电流与浓度呈良好的线性关系,检测限(S/N=3)为5.0×10-8M。固定5-HT,DA浓度在6.0×10-7-1.0×10-4M的范围内,DA的氧化峰电流与浓度成良好的线性关系,检测限(S/N=3)为8.0×10-8M。AA和高香草酸均不干扰测定。该微传感器在线测定了小鼠脑中DA和5-HT的含量,同时考察了DA和5-HT在小鼠脑中随时间的变化。结果与高效液相色谱方法相比较,显示了较好的一致性。(3)比较了GR-FeTSPc和多壁碳纳米管-四磺酸基酞菁铁(MWCNTs-FeTSPc)两种复合物的光电化学特性。用紫外分光光度法(UV)和红外分光光度法(FTIR)比较了两种材料的光学性质,结果表明MWCNTs-FeTSPc的最高分子占有轨道与最低分子占有轨道的能量间隙比GR-FeTSPc的要宽。以丝网印刷电极(SPE)为基底电极,四种神经递质分子DA、UA、AA、去甲肾上腺素(NE)作为探针分子,分别用循环伏安法和安培法比较了GR-FeTSPc和MWCNTs-FeTSPc两种复合材料的电化学及电分析化学特性。结果表明,两种材料对四种生物分子均有很强的电催化作用,但是对于UA和NE的电催化作用略有差异。安培法结果表明,DA、UA、AA、NE四种生物分子在GR-FeTSPc/SPE电极上的线性范围比MWCNTs-FeTSPc/SPE更宽,两种材料均有很好的电分析化学特性,重现性都较好, GR-FeTSPc更适合于电化学分析。两种材料具有相似的光电性质。(4)制备了GR-FeTSPc-Nafion修饰的丝网印刷电极,该电极对H2O2的氧化有很强的选择性和灵敏度,在无酶情况下,H2O2的氧化峰在+0.35V。用CV法研究了不同石墨烯复合材料对H2O2的氧化机理,发现Fe中心催化了H2O2的氧化,而GR具有联合放大作用,GR与FeTSPc的相互作用增强了电催化,加速了电子传递。安培法研究了H2O2的线性和选择性,H2O2的线性范围为2.0×10-7-5.0×10-3M,检测限为8.0×10-8M (S/N=3),灵敏度为36.93μA mM-1cm-2,表明对H2O2的测定具有较好的灵敏度。选择性实验表明在生理条件下,允许的误差范围内,DA、葡萄糖、乙醇、AA和UA不干扰测定。用该传感器测定了消毒水中的H2O2。此外,将复合物与葡萄糖氧化酶结合,成功的构建了葡萄糖生物传感器,并考察了生物传感器的线性和使用寿命。(5)利用多孔碳(OMC)的尺寸选择性,构建了多孔碳-Nafion膜修饰的玻碳电极(OMC-Nafion/GCE),该电极对O2还原有很好的催化作用,还原峰电位为-0.47V。当有氯霉素(CAP)分子存在时,O2和CAP在OMC-Nafion/GCE上发生竞争性电化学反应,结果O2的还原峰位于-0.35V,正移了0.12V,而氯霉素的还原峰峰位于-0.79V,与单独氯霉素存在时相比,峰电位负移40mV。两峰峰电位相差440mV,在OMC-Nafion/GCE电极上能同时进行O2和CAP的测定。O2在氮气、空气和氧气饱和的PBS溶液中的线性相关系数为0.9990,氯霉素的线性范围为5.0×10-7-6.0×10-5M,检测限(S/N=3)为8.5×10-9M,并在不除氧的条件下同时测定了蜂蜜中的O2和CAP。
其他文献
<正>"互联网+"未来的发展趋势是要把政府、政策,甚至法制、政府的管理机制、社会的管理机制都进行"互联网+"改造,才有可能配合所有的产业和所有的社会人口实现互联网上的生活
近年来,随着全球化市场竞争的加剧、消费者需求的多样化、信息技术的进步,企业与企业之间的竞争已经逐步转变为供应链与供应链之间的竞争。因此,加强供应链管理已经逐渐成为企业
古往今来,人类对自身的生命历程始终充满了好奇,古希腊人借助神话斯芬克斯之谜敲开了我们对“人”这个生物进行哲学探索的大门。在这之后的时间里,无数思想家、哲学家通过思考
作为贯穿于整个油气地质历史的地质作用过程,油气运移一直是石油地质学研究的核心问题。油气优势运移通道的预测是油气运移研究的关键问题,也是目前尚未解决的难点。采用基于
<正>5月14日,国务院常务会议讨论并原则通过《中华人民共和国食品安全法(修订草案)》。会议决定,修订草案经进一步修改后提请全国人大常委会审议,此次修订草案被专家称为"最
文安斜坡位于霸县凹陷东部,西临霸县生油洼陷,已发现馆陶组(Ng)、东营组(Ed)以及沙一段(Esl)等七套含油层系,探明储量主要集中于斜坡中带。近些年研究表明,文安斜坡外带浅层
<正> 一、前言小功率半导体二极管这种管壳的外引线为φ0.5mm的杜美丝。为提高外引线的抗蚀性和易焊性,一直采用手工热浸锡方法。但是,手工热浸锡存在以下问题,1.锡层不能全
目的以廊下镇社区卫生服务中心为研究对象,深入分析该辖区居民、社区卫生服务中心、全科医生和政府四方满意的内涵,构建其满意评价模型。方法利用文献回顾、访谈等方法,分析
<正> 香菇生料栽培一直是食用菌工作者十分感兴趣的课题。我们在1986~1988年,利用3年时间进行液体菌种牛料栽培香菇试验,已获得成功,现将技术关键简介如下: 一、液体菌种制作
晚清域外游记作为兼具文学文本和历史文献双重性质的宝贵资料,为还原百年以前中国借径西方、自强救国的艰难历程提供了可能。同时,也为海外行旅与文学变革这一命题提供了诸多