miRNA-375对脑胶质瘤增殖和凋亡的作用与机制研究

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背景:胶质瘤(Glioma)是中枢神经系统最常见的原发性肿瘤。根据美国脑肿瘤协会的数据,胶质瘤占所有原发性脑肿瘤的24.7%,占所有恶性肿瘤的74.6%。尽管目前的治疗包括手术,然后是放疗和化疗等,如替莫唑胺治疗等,但是肿瘤仍然容易再次出现,患者平均生存时间约15个月。使用低强度、中频交变电场结合标准化放射治疗患者,可以在新诊断为胶质母细胞瘤的患者中将总的生存时间增加到19.4个月。然而,存活的胶质瘤患者往往会遭受一系列治疗引起的破坏性的长期的副作用。因此,更好地了解疾病的分子机制对于开发新的治疗策略仍然是至关重要的。miRNA-375在肿瘤发生和发展中起着重要的调控作用,并且在癌症的增殖,侵袭和凋亡中起调节作用。方法:分别收集脑胶质瘤30例肿瘤标本和30例大面积脑梗死脑组织标本(石蜡包埋后的切片)。分别通过原位杂交(In situ hybridization,ISH)和免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)方法检测和评估miRNA-375和结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)蛋白质的表达。胶质瘤细胞系研究,将U87细胞分成3组:NC组(细胞用正常方法处理);BL组(细胞用空载体转染)和miRNA组(用miRNA-375转染U87细胞)。MTT法检测3组细胞的增殖情况。流式细胞术检测各组U87细胞凋亡率和细胞周期。应用WB法检测相关蛋白(CTGF,EGFR,AKT,Erk和P21)的表达。结果:1.通过ISH检测提示胶质瘤组织中miRNA-375的表达较非肿瘤组织中miRNA-375的表达水平低,差异显著(P<0.05)。2.通过IHC检测提示胶质瘤组织中CTGF的表达较非肿瘤组织中CTGF的表达水平高,有显著性差异(P<0.05)。3.细胞增殖实验提示,miRNA组细胞增殖率明显低于NC组及BL组(P<0.05)。4.细胞凋亡检测结果,与NC组及BL组相比较,miRNA组细胞凋亡率和G1期细胞比例存在显著差异(P<0.05)。5.根据WB实验,miRNA组的CTGF,EGFR,AKT,Erk和P21蛋白表达与NC组相比差异显著(P<0.05)。结论:1.miRNA-375过表达能抑制脑胶质瘤的增殖。2.miRNA-375过表达能促进脑胶质瘤的凋亡。3.miRNA-375通过CTGF-EGFR途径抑制神经胶质瘤细胞发育。
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